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印迹杂交技术检查什么

发布时间:2022-02-01 15:25:35

❶ 什么是分子印迹技术

第八章 分子印迹技术

将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印迹技术(blotting)。

Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链,然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose, NC)膜放在凝胶上,上面放上吸水纸巾,利用毛细管作用原理使凝胶中的DNA片段转移到 NC膜上,使之成为固相化分子。载有DNA单链分子的 NC膜就可以在杂交液与另一种带有标记的 DNA或RNA分子(即探针)进行杂交,具有互补序列的RNA或DNA结合到存在于 NC膜的 DNA分子上,经放射自显影或其他检测技术就可以显现出杂交分子的区带。由于这种技术类似于用吸墨纸吸收纸张上的墨迹,因此称为“blotting”,译为印迹技术。

生物大分子印迹技术发展极为迅速,己广泛用于 DNA、RNA、蛋白质的检测。通常人们将DNA印迹技术称为Southern blotting,将RNA印迹技术称为Northern blotting,将蛋白质印迹技术称为Western blotting,将不经凝胶的印迹技术称为斑点印迹(Dot blotting)。

❷ 印迹杂交技术数量5是什么意思

印迹杂交技术数量5是采用印迹杂交技术编号为5的印迹杂交技术进行实验操作。

印迹杂交,是基因诊断技术的一种,有多种方式:

第一种是Northern印迹杂交,是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。

第二种是Southern印迹杂交,是由凝胶电离经限制性内切酶消化的DNA片段。第三种是Western印迹杂交,是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离,再转移到杂交膜(blot)上,然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。

(2)印迹杂交技术检查什么扩展阅读:

Northern杂交用于分析RNA;Southern杂交用于分析DNA;

Western杂交用于分析蛋白质。

大致过程如下:

(1)酶切DNA,凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。

(2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。

(3) 预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。

(4) 让探针与同源DNA片段杂交,然后漂洗除去非特异性结合的探针。

(5) 通过显影检查目的DNA所在的位置。

❸ 印迹杂交技术怎么收费

没必要,就算看出你有基因缺失,也干不了什么,多收费而已!一种染色体检查技术,主要用来检查dna。可以用来检查疾病,进行相关鉴定。

❹ 妇科检查有必要做印迹杂交技术检查什么

印迹杂交技术是种基因检查技术,用来检测DNA序列的,常用来检测各种病毒性疾病

❺ 印迹杂交和核糖核酸dna测序是查什么的

Northern印迹杂交用于分析RNA
Southern印迹杂交用于分析DNA
Western印迹杂交用于分析蛋白质
核糖核酸是RNA
脱氧核糖核酸才是DNA
测序是为测定基因全序列,预测罹患多种疾病的可能性。

❻ 基因多态性检测是不是印迹杂交技术

A
BCD都是Southern Bloting的事,E是Northern Blotting,Western只能查蛋白质,也就是基因表达的结果.

❼ 核酸印迹杂交技术的一般步骤有哪些

并介绍了点杂交的基本概念及实验原理、方法. 几种核酸杂交技术的比较?点杂交实验原理、步骤(1)几种核酸杂交的异同点核酸杂交是分子生物学的基本技术,也是遗传学研究和基因诊断的常用方法.核酸杂交的形式有多种,其中最常用的是Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、点杂交等.虽然形式多样,但都是基于核酸分子的碱基互补原理.从杂交材料来看,杂交分为DNA-DNA杂交、DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交.从杂交分子状态来看,杂交分为液相-固相杂交和液相-液相杂交. 上述几种杂交都属于液相-固相杂交,即将参与杂交的一方分子固定在固相的支持载体上,另一方分子以液相形式参与杂交.参与杂交的双方分子必有一方被标记,以便产生能够被检出的杂交信号;在液相-固相杂交中往往液相分子被标记,这样才能产生有意义的差别信号.在杂交在中,被标记的分子称为探针,而与探针进行杂交的分子称为被检测样品(被检分子).大多数液相-固相杂交中被检样品往往是混合分子,如提取的基因组DNA或某种组织的RNA,并且将被检样品固定在载体上,而探针往往是单一分子,如某一基因的片断.杂交结果是根据信号的强弱和位置进行判断,如被检分子的分子量(或长度),被检分子的表达强度等.这种杂交适用于相同基因片断对不同样品的检测.若进行一种样品被不同基因片断的检测时,就必须采取反向的方式,即将不同的基因片断固定在载体上,而将被检样品制成液相并进行标记.这种反向的方式称为反向杂交,反向杂交中被标记的样品也可以称为探针. 在液相-固相杂交中固相载体往往采用尼龙膜或醋酸纤维膜,这些经过特殊处理的材料对核酸分子具有强大的吸附力,在操作中不易脱落.探针标记往往采用放射性标记,如32P、35S等,由于放射性物质的危害性,现在非放射性标记也在广泛使用,如生物素标记、地高辛标记等.一般来说,放射性标记适用于Southern杂交、Northern杂交和点杂交,非放射性标记适用于原位杂交.放射性标记灵敏度高,线形范围宽,非放射性标记定位性强,没有衰变,危害小. (2)点杂交的概念点杂交(dot blot)是杂交信号呈现斑点样的杂交方法,在操作上是把参与杂交的一方分子点样到膜上.由于杂交分子预先没有进行像Southern杂交和Northern杂交之前的电泳分离,也没有像原位杂交那样,杂交一方的分子已经表现出组织细胞分布的位置特异性,所以点杂交的结果判断完全视杂交信号的强弱,其信息量没有其它杂交形式的信息量丰富.但点杂交的操作比较简单、结果直观、适用于大批样品的检测,因此它在许多方面也得到了广泛的应用. 一、实验目的理解核酸杂交原理;熟悉核酸杂交的一般方法,掌握膜斑点杂交技术和结果分析. 二、实验原理点杂交是核酸杂交中比较简单的一种技术,本质上也是单链核酸分子通过碱基互补而形成双链核酸的过程,当某单链分子被标记后,就可以检测与其互补的分子. (一)印迹印迹(blot)就是将杂交一方的分子固定在膜上,对于Southern杂交和Northern杂交,往往采用毛细转移,真空转移或电转移等方法,使电泳分离的核酸分子“原位印迹”到膜上去,而点杂交则可采取人工点样的方法,将核酸分子固定到膜上去.在点膜时还要借助其它使核酸分子固定的方法(如点膜器、真空抽气装置)使分子更紧密地结合在膜上,并且不扩散.点杂交的印迹过程提供了一个固化平台和阵列,使杂交在已知位置上进行. (二)标记标记(labeling)就是使参与杂交的一方分子带有可识别的物质,使杂交后显示信号.常用标记物有放射性同位素和非放射性物质,标记方法有随机引物标记法、缺口平移法和末端标记法等.在液相-固相杂交中,标记往往在液相分子上,使探针成为流动相.标记效率是影响杂交的重要因素,在一定范围内,比活性(可以理解为单位分子中的标记物数量与活性)越高越好.在杂交中,探针往往是过量的(杂交信号的强弱反映的是被检样品的量和基因丰度),所以依靠增加探针量来提高杂交灵敏度的做法很有限的,应该提高探针的比活性.

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