❶ 举例说明三种柱层析的原理
在生物科学研究中，层析技术被广泛应用，尤其是蛋白质的分离分析。这里简要介绍三种常见的柱层析方法。
首先，吸附层析是一种重要的技术，其原理是利用固定相和流动相之间的吸附作用来分离物质。吸附柱层析是通过固体吸附剂与有机溶剂或缓冲液形成柱状结构来实现的。另一种形式的吸附层析是薄层层析，它使用涂布于玻板或涤纶片上的基质作为固定相，以液体为流动相。聚酰胺薄膜层析则依赖于聚酰胺与被分离物之间形成的氢键，这种氢键的强弱决定了物质与聚酰胺薄膜间的吸附能力。
接着，离子交换层析涉及离子交换剂作为固定相，通过离子交换反应或吸附作用来分离溶液中的离子或离子化合物。离子交换剂由基质、电荷基团和反离子构成，能够与溶液中的离子或离子化合物发生反应。
再者，凝胶过滤技术，又称为分子筛层析，利用凝胶的网状结构对不同分子量的物质进行分离。当混合溶液通过凝胶过滤层析柱时，溶液中的物质会按照分子量大小进行筛分。
最后，亲和层析基于特定配体与目标分子之间的特异性结合。这种技术与酶与底物之间的特异性反应类似，但配体作为固相存在。通过将具有识别能力的配体共价键连接到基质上，制成固相载体，从而实现对特定物质的选择性分离。