Ⅰ PCR复制n次,至少需要加入多少引物
每一条子链的合成都需要一个
引物
。PCR复制n次,产生DNA的个数2^n,每个DNA两条链,共2^n*2=2^(n+1),再减去两条
母链
,所以至少需要加入引物个数2的n+1次方减2
Ⅱ PCR复制n次,至少需要加入多少引物
每一条子链的合成都需要一个引物。PCR复制n次,产生DNA的个数2^n,每个DNA两条链,共2^n*2=2^(n+1),再减去两条母链,所以至少需要加入引物个数2的n+1次方减2
Ⅲ pcr需要几个引物
普通PCR需要正反向引物各一条,即一对引物,有些特殊PCR需要多条引物。
Ⅳ 生物选修三中PCR技术,将一个DNA分子复制8次,至少需要几对引物 要解答
需要两对不会引起碱基互补配对原的引物。。。这和复制次数没有关系。
Ⅳ 利用PCR技术复制那么多DNA一共需要多少引物每复制一次都需要一段引物吗
你理解的不错,每次复制都需要消耗一对引物。不过原理还是要好好学哦。
首先引物是论“对”就是两条(rapd等特殊pcr用单条,lamp用6条……算了,那个不是pcr),这n对引物是完全一样的。不要说“段”,说段会被误会成不一样的序列的~因此你这个题目也可以答成“一个完整的pcr中,n次复制扩增都是同一段引物引导的”。
引物虽然分子的数量很大,但是,那是分子啊~~~反应前加试剂只加几微升就好了。放心~
Ⅵ PCR技术和DNA复制需要引物吗如果需要,分别是什么
你做PCR是需要引物的,引物的用量、条数和种类根据你实验的目的而定,例如普通的扩增有上下游两条引物即可,有的多重PCR检测需要多对引物同时工作,有的PCR需要引物上引入酶切位点,有的PCR要求引物具有一定的随机性等等。
而DNA复制我不是太明白意思。是指从基因组上复制一段序列下来吗?还是指生物体内DNA分子复制过程?
如果你只是想利用PCR技术复制一段DNA片段的话,找出序列信息,利用DNAstar,primer premier等软件设计一对合适的引物,交给例如华大基因、上海生工等公司去合成就,引物拿到后用基因组DNA做模板,跑个PCR就可以了。
而如果你问的是在生物体内的DNA复制,那是需要RNA引物的。体内的双螺旋在DNA解旋酶的作用下打开后,形成两条单链。DNA聚合酶以此两条单链为模板,在每条单链的5‘端合成一小段RNA片段作为引物,接着往下复制。解旋酶揭开多少,就复制多少,每解开一段,就在这一段的开头加一个RNA引物。在此过程中就会看到RNA引物-DNA-RNA引物-DNA这样的重复,每一个重复就叫做一个冈崎片段。
原理如楼上所说。
Ⅶ PCR引物浓度一般选多少
PCR引物浓度一般选5~20μmol/L。
PCR反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。
引物有多种设计方法,由PCR在实验中的目的决定,但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。
模板即扩增用的DNA,可以是任何来源,但有两个原则,第一纯度必须较高,第二浓度不能太高以免抑制。
缓冲液的成分最为复杂,除水外一般包括四个有效成分:缓冲体系,一般使用HEPES或MOPS缓冲体系;一价阳离子,一般采用钾离子,但在特殊情况下也可使用铵根离子;二价阳离子,即镁离子。
(7)pcr技术中拷贝时要多少引物扩展阅读
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③引物的延伸:DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性-退火-延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”。
而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
Ⅷ 用pcr技术复制了n次需要多少个引物
用pcr技术复制了n次需要多少个引物:
10uM浓度的引物,加个1ul足矣
可根据你自身实验情况调节
Ⅸ 利用PCR技术复制那么多DNA一共需要多少引物每复制一次都需要一段引物吗
你理解的不错,每次复制都需要消耗一对引物.不过原理还是要好好学哦.首先引物是论“对”就是两条(rapd等特殊pcr用单条,lamp用6条……算了,那个不是pcr),这n对引物是完全一样的.不要说“段”,说段会被误会成不一样的...
Ⅹ 1个DNA分子进行PCR扩增,循环4次,理论上至少需要几个引物
如果是双链,第一次循环要1对引物,第二次要2对,第三次4对,第四次要8对.总共15对.上下游引物各15条.
如果是单链,第一次循环要1条引物,第二次要1对,第三次2对,第四次要4对.总共7对半.上下游分别8和7条.
不过这都是理论,实际上引物要多得多才能P出来!