1. 病原体的培养和分离
虽较直接检查法为慢,且较为复杂,但更准确,应用范围也更广,几乎可用于所有的病原体。一般除病毒、衣原体和立克次氏体外,都可用无生命的培养基培养和分离。培养基的种类很多,可根据不同的病原体加以选用。培养分离病原体后,还可进行各种试验,如发酵试验、毒力试验等,这对病原体的进一步鉴定非常重要。病毒、衣原体和立克次氏体缺乏维持生命所必须的各种酶,不能像细菌那样从培养基中摄取营养物质,利用自己的酶来合成自己所需的各种成分,不能用无生命的培养基培养,而必须接种到有生命的机体内,利用机体的酶来合成它们所需的各种成分。这种方法称“病毒分离”、“衣原体分离”或“立克次氏体分离”。
分离的方法一般有三种:
①组织培养。最简单常用;
②动物胚胎(如鸡胚、鸭胚)接种;
③动物接种,如接种小白鼠、豚鼠等。不同的病毒、衣原体或立克次氏体常需要不同的分离方法,分离阳性后也常需进行各种试验(如血清学试验等)才能最后判定其种类。病原体的直接检查常与病原体的培养分离同时进行。
除上述两种方法外,还有一些特殊的检查方法。例如对怀疑为的人或动物可取其脑组织检查特异性包涵体(内格里氏小体)确诊;检查乙型肝炎表面抗原可用反向被动血凝法(RPHA)酶联免疫吸附试验(ELISA)及放射免疫试验(RIA)等方法;检查粪便中的甲型肝炎病毒可用免疫电镜等。还可应用分子杂交或核酸分析的方法来检验病人血液、组织或排泄物中的病原体核酸以协助诊断,如血液中及肝组织中的乙型肝炎病毒核酸,就可用分子杂交的方法检测;粪便中的轮状病毒可用核酸分析的方法来检测等。由于病原体的各种抗原和病原体的核酸都是病原体的特异性成分,因此如果它们出现阳性也就表示病原体阳性,故这些方法也具有很大的确定诊断的意义。
2. 流行病毒的分离培养与鉴定实验的原理
RT-PCR。利用Vero细胞进行病原分离,经RT-PCR鉴定及测序分析。血液、体液、分泌物、粪便等宿主来源并包含病毒的物质称病料,病毒分离时,传代细胞系、原代细胞是常用的分离方法。
3. 高致病性禽流感诊断方法和程序是什么
(1)流行病学
禽流感病毒的宿主广泛,鸡、火鸡、鸭、鹅、鹌鹑和雉鸡等家禽及野鸟、水禽、海鸟等均可感染。其中以鸡和火鸡感染禽流感病毒后的危害最为严重,而在鸭中分离到的病毒比其他禽类多。各种日龄的禽均可感染。
禽流感病毒主要通过与患禽(包括与患禽接触的器具)的直接接触和间接接触传染。此外,带毒的飞鸟或水禽常常成为传染源,引起家禽大批发病和死亡。
(2)临床症状
禽流感的潜伏期从几小时到3天不等,潜伏期的长短依赖于感染病毒的毒力和剂量、感染途径、被感染禽的种别和禽体的状态。急性感染的禽流感无特定临床症状,在短时间内可见食欲废绝,体温骤升,呼吸道症状,下痢,后期出现神经症状。伴随大量死亡。
(3)病理变化
禽流感的病理变化因感染毒株毒力的强弱、病程长短和禽种的不同而变化不一。主要表现为头肿,肉髯、冠出血,小腿和趾部皮下出血,腺胃乳头出血及输卵管炎等。
(4)病原学诊断
病毒分离需由国家规定的实验室完成。
(5)血清学诊断
目前用于禽流感检测的方法有禽流感病毒分离技术、琼脂扩散(AGP)试验、血凝试验、血凝抑制(HI)试验、神经氨酸酶抑制(NI)试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)、病毒中和试验(SN)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫荧光技术(IF)及核酸探针技术。其中血凝试验、血凝抑制试验和琼脂扩散试验是OIE推荐使用的方法。
禽流感病毒血凝素分型抗原和标准分型血清均由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供,按说明书操作。
4. 目前病毒分离培养的主要方法是哪一种
1.动物接种
这是最原始的病毒培养方法。常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接种的途径有鼻内、皮下、皮内、脑内、腹腔内、静脉等。根据病毒种类不同,选择敏感动物及适宜接种部位。
2.鸡胚接种鸡胚对多种病毒敏感。根据病毒种类不同,可将标本接种于鸡胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜上。
3.组织培养
将离体活组织块或分散的活细胞加以培养,统称为组织培养。组织培养法有三种基本类型:器官培养、移植培养和细胞培养。细胞培养最常用于培养病毒,根据细胞的来源,染色体特性及传代次数又可分为下列类型:原代和次代细胞培养,二倍体细胞株和传代细胞系。
5. 病毒毒株是怎么分离的
病毒毒株分离就是用含病毒的标本材料接种到适合的细胞里面。在这过程中要保证绝对的无菌环境操作,排除各种杂菌和其它微生物的污染。所以,一个有资质的、绝对干净,无污染的实验室和保证安全洁净的标准操作是整个流程的关键点。
成功分离出新型冠状病毒毒株的浙江省疾控中心微生物检验所所长张严峻:我们从病人痰液标本里面给它(新型冠状病毒毒株)处理了以后,接种到相应的细胞里,(让)这个病毒在细胞里能够生长。到了1月24日,我们对培养物进行鉴定,病毒已经在细胞里增殖,说明这个病毒培养分离已经成功了。
不是随便一个实验室都具有分离培养新型冠状病毒的资质,要有这个资质,至少要有生物安全三级实验室,而且实验室人员资质、工作流程、污染物的处理都要通过严格的审核,同时对于每一种高致病性病毒分离培养活动,都要专门向国家卫生健康委员会提出申请,经过审核后才能开展特定的分离和培养活动。
(5)病毒分离程序是什么扩展阅读:
分离病毒毒株的意义
这能知道病毒是通过什么样的途径侵入到人体当中怎样的细胞器官里去的、在人体里面是怎么样繁殖的、哪些部位会产生一些毒粒、这些毒粒怎样作用于人类让人类生病、最后这个病毒怎样排出来再去感染人。通俗说可以知道它是谁、它到底要到哪里去、去的哪个地方它到底要做哪些事情、做完坏事情之后它又怎样逃出来到另外一个地方去干同样的坏事,整个过程都可以给它弄清楚。
了解了整个过程之后,医药专家就可以针对性地去研究相应的药物和疫苗,对病毒的预防、治疗有着重大意义。
6. 简述鸡新城疫病毒的分离鉴定步骤。
(1)病料的采集和处理可采集病鸡呼吸道分泌物、脾脏、血液、脑组织,按1:5的比例假入灭菌的生理盐水或缓冲液,用研磨器将组织研碎制成20%的悬液,反复冻融2-3次,5000r/min离心20分钟,取上清,用灭菌滤器过滤除菌或加抗生素杀灭病料中杂菌。
(2)分离培养将处理好的病料经尿囊腔接种9-11日龄无母源抗体的鸡胚,37℃孵育,每天照蛋2次,弃除24小时内死亡胚,收集24-96小时死亡胚,96小时内未死亡胚取出。
(3)收集鸡胚尿囊液采用血凝试验检查是否有血凝活性,对有血凝活性分离物应用标准的抗新城疫病毒,采用血凝抑制血清学试验对病毒进行鉴定。
确定为新城疫病毒后对病毒的致病性做进一步鉴定--致病性试验。
7. 怎么样把病毒从受感染文件中分离出来
分离要看你采用的是那种感染技术是添加新节还是采用插缝,如果是前者相对简单,后者就有点麻烦,具体自己网络下,几句是很难说清楚的
8. 动物病毒如何分离
细胞破碎,离心,病毒都在上清里。
9. 电脑里的病毒程序是什么
一种恶意计算机代码,可以破坏系统程序,占用空间,盗取账号密码。严重可以导致网络、系统瘫痪。 详见计算机病毒
去除方法
使用安 巴尔的摩分类法是基于病毒mRNA的合成方式
全的杀毒软件清除。
病毒名
由以下6字段组成的:主行为类型.子行为类型.宿主文件类型.主名称.版本信息.主名称变种号#附属名称.附属名称变种号.病毒长度。其中字段之间使用“.”分隔,#号以后属于内部信息,为推举结构。
主行为类型与病毒子行为类型
病毒可能包含多个主行为类型,这种情况可以通过每种主行为类型的危害级别确定危害级别最高的作为病毒的主行为类型。同样的,病毒也可能包含多个子行为类型,这种情况可以通过每种主行为类型的危害级别确定危害级别最高的作为病毒的子行为类型。其中危害级别是指对病毒所在计算机的危害。 病毒主行为类型有是否显示的属性,用于生成病毒名时隐藏主行为名称。它与病毒子行为类型存在对应关系,见下表: 主行为类型 子行为类型 Backdoor 危害级别:1 说明: 中文名称—“后门”, 是指在用户不知道也不允许的情况下,在被感染的系统上以隐蔽的方式运行可以对被感染的系统进行远程控制,而且用户无法通过正常的方法禁止其运行。“后门”其实是木马的一种特例,它们之间的区别在于“后门”可以对被感染的系统进行远程控制(如:文件管理、进程控制等)。 Worm 危害级别:2 说明: 中文名称—“蠕虫”,是指利用系统的漏洞、外发邮件、共享目录、可传输文件的软件(如:MSN、OICQ、IRC等)、可移动存储介质(如:U盘、软盘),这些方式传播自己的病毒。这种类型的病毒其子型行为类型用于表示病毒所使用的传播方式。 Mail 危害级别:1 说明:通过邮件传播 IM 危害级别:2 说明:通过某个不明确的载体或多个明确的载体传播自己 MSN 危害级别:3 说明:通过MSN传播 QQ 危害级别:4 说明:通过OICQ传播 ICQ 危害级别:5 说明:通过ICQ传播 P2P 危害级别:6 说明:通过P2P软件传播 IRC 危害级别:7 说明:通过ICR传播 说明:不依赖其他软件进行传播的传播方式,如:利用系统漏洞、共享目录、可移动存储介质。 Trojan 危害级别:3 说明: 中文名称—“木马”,是指在用户不知道也不允许的情况下,在被感染的系统上以隐蔽的方式运行,而且用户无法通过正常的方法禁止其运行。这种病毒通常都有利益目的,它的利益目的也就是这种病毒的子行为。 Spy 危害级别:1 说明:窃取用户信息(如:文件等) PSW 危害级别:2 说明:具有窃取密码的行为 DL 危害级别:3 说明:下载病毒并运行 一、判定条款: 没有可调出的任何界面,逻辑功能为:从某网站上下载文件加载或运行. 二、逻辑条件引发的事件: 事件1、.不能正常下载或下载的文件不能判定为病毒。 操作准则:该文件不能符合正常软件功能组件标识条款的,确定为:Trojan.DL 事件2.下载的文件是病毒 操作准则: 下载的文件是病毒,确定为: Trojan.DL IMMSG 危害级别:4 说明:通过某个不明确的载体或多个明确的载体传播即时消息(这一行为与蠕虫的传播行为不同,蠕虫是传播病毒自己,木马仅仅是传播消息) MSNMSG 危害级别:5 说明:通过MSN传播即时消息 QQMSG 危害级别:6 说明:通过OICQ传播即时消息 ICQMSG 危害级别:7 说明:通过ICQ传播即时消息 UCMSG 危害级别:8 说明:通过UC传播即时消息 Proxy 危害级别:9 说明:将被感染的计算机作为代理服务器 Clicker 危害级别:10 说明:点击指定的网页 判定条款: 没有可调出的任何界面,逻辑功能为:点击某网页。 操作准则: 该文件不符合正常软件功能组件标识条款的,确定为:Trojan.Clicker。 (该文件符合正常软件功能组件标识条款,就参考流氓软件判定规则进行流氓软件判定) Dialer 危害级别:12 说明:通过拨号来骗取Money的程序 说明:无法描述其利益目的但又符合木马病毒的基本特征,则不用具体的子行为进行描述 AOL 按照原来病毒名命名保留。 Notifier 按照原来病毒名命名保留。 Virus 危害级别:4 说明:中文名称—“感染型病毒”,是指将病毒代码附加到被感染的宿主文件(如:PE文件、DOS下的COM文件、VBS文件、具有可运行宏的文件)中,使病毒代码在被感染宿主文件运行时取得运行权的病毒。 Harm 危害级别:5 说明:中文名称—“破坏性程序”,是指那些不会传播也不感染,运行后直接破坏本地计算机(如:格式化硬盘、大量删除文件等)导致本地计算机无法正常使用的程序。 Dropper 危害级别:6 说明:中文名称—“释放病毒的程序”,是指不属于正常的安装或自解压程序,并且运行后释放病毒并将它们运行。 一.Dropper判定条款: 没有可调出的任何界面,逻辑功能为:自释放文件加载或运行。 二.逻辑条件引发的事件: 事件1:.释放的文件不是病毒。 操作准则: 释放的文件和释放者本身没逻辑关系并该文件不符合正常软件功能组件标识条款的,确定为:Droper 事件2:释放的文件是病毒。 操作准则: 释放的文件是病毒,确定该文件为:Droper Hack 危害级别:无 说明:中文名称—“黑客工具”,是指可以在本地计算机通过网络攻击其他计算机的工具。 Exploit 说明:漏洞探测攻击工具 DDoser 说明:拒绝服务攻击工具 Flooder 说明:洪水攻击工具 说明:不能明确攻击方式并与黑客相关的软件,则不用具体的子行为进行描述 Spam 说明:垃圾邮件。 Nuker Sniffer Spoofer Anti 说明:免杀的黑客工具 Binder 危害级别:无 说明:捆绑病毒的工具 正常软件功能组件标识条款:被检查的文件体内有以下信息能标识出该文件是正常软件的功能组件:文件版本信息,软件信息(注册表键值、安装目录)等。 Autorun 危害级别:9 说明:用U盘传播的系统文件(被利用) 这样的病毒杀毒软件查不出来 宿主文件 宿主文件是指病毒所使用的文件类型,有是否显示的属性。目前的宿主文件有以下几种。 JS 说明:JavaScript脚本文件 VBS 说明:VBScript脚本文件 HTML 说明:HTML文件 Java 说明:Java的Class文件 COM 说明:Dos下的Com文件 EXE 说明:Dos下的Exe文件 Boot 说明:硬盘或软盘引导区 Word 说明:MS公司的Word文件 Excel 说明:MS公司的Excel文件 PE 说明:PE文件 WinREG 说明:注册表文件 Ruby 说明:一种脚本 Python 说明:一种脚本 BAT 说明:BAT脚本文件 IRC 说明:IRC脚本
主名称
病毒的主名称是由分析员根据病毒体的特征字符串、特定行为或者所使用的编译平台来定的,如果无法确定则可以用字符串”Agent”来代替主名称,小于10k大小的文件可以命名为“Samll”。
版本信息
版本信息只允许为数字,对于版本信息不明确的不加版本信息。
主名称变种号
如果病毒的主行为类型、行为类型、宿主文件类型、主名称均相同,则认为是同一家族的病毒,这时需要变种号来区分不同的病毒记录。如果一位版本号不够用则最多可以扩展3位,并且都均为小写字母a—z,如:aa、ab、aaa、aab以此类推。由系统自动计算,不需要人工输入或选择。
附属名称
病毒所使用的有辅助功能的可运行的文件,通常也作为病毒添加到病毒库中,这种类型的病毒记录需要附属名称来与病毒主体的病毒记录进行区分。附属名称目前有以下几种: Client 说明:后门程序的控制端 KEY_HOOK 说明:用于挂接键盘的模块 API_HOOK 说明:用于挂接API的模块 Install 说明:用于安装病毒的模块 Dll 说明:文件为动态库,并且包含多种功能 (空) 说明:没有附属名称,这条记录是病毒主体记录
附属名称变种号
如果病毒的主行为类型、行为类型、宿主文件类型、主名称、主名称变种号、附属名称均相同,则认为是同一家族的病毒,这时需要变种号来区分不同的病毒记录。变种号为不写字母a—z,如果一位版本号不够用则最多可以扩展3位,如:aa、ab、aaa、aab以此类推。由系统自动计算,不需要人工输入或选择。
病毒长度
病毒长度字段只用于主行为类型为感染型(Virus)的病毒,字段的值为数字。字段值为0,表示病毒长度可变。
10. 实验室是如何分离生物病毒的
我觉得这个里面的东西咱们根本就不太懂,实验室它就是有它单独的方法来分离那些生物病毒,那个是需要技术方面的问题,并不是一般的人就可以懂得的问题。