貝類主要病毒性疾病的檢測技術有哪些

❶ 感染諾如病毒遇到哪些情況需就醫

正值冬春交際，全國各地也迎來開學季，醫院兒科門急診近期接診到一些出現嘔吐、腹瀉症狀的小朋友，被診斷為諾如病毒感染。如果孩子出現了嘔吐和腹瀉，且持續了2-3天，就應該要懷疑諾如病毒感染，應立即送醫！

特別需要注意的是：

• 牡蠣等雙殼貝類可以富集海水中的諾如病毒，為高風險食物。
  

• 食源性傳播所致疫情多數由感染諾如病毒的廚工污染食物所致。
  

❷ 請問SLV是什麼東西

諾沃克類病毒與腹瀉
人嵌環樣病毒：札幌類病毒（SLV）。
諾沃克病毒（Norwalk virus）的感染是成人和大齡兒童流行性非細菌性腸炎的主要病因，四季均可發病。發病後的主要臨床表現為疲勞、腹部痙攣、惡心、嘔吐、腹疼、腹瀉等，兒童以嘔吐多見，成人則以腹瀉多見；此外還可見寒戰、發熱、肌肉痛和頭痛，少數有眼痛及咳嗽等上呼吸道症狀；其症狀較輪狀病毒輕，腹瀉一般為中等量，24小時內約4~8次，稀便至水樣便，無膿血，無粘液和白細胞。病程一般為2~7天，為一預後良好的自限性疾病。
諾沃克類病毒的一般特性：該病毒於1968年在美國俄亥俄州諾沃克暴發而被發現，國際病毒分類委員會（ICTV）於1995年發表的第六次病毒分類報告上被劃分為脊椎動物病毒（Vertebrate Virus）嵌環樣（杯狀）病毒科（Caliciviridae）諾沃克類病毒屬（Norwalk-like Virus，NLVs），諾沃克病毒（Norwalk Virus）為其代表種。
諾沃克病毒的毒粒無包膜，為二十面體對稱的圓狀顆粒，直徑約25~35nm。毒粒上有32個杯狀的表面凹陷(T=3)，基因組由單分子的正鏈ssRNA組成，長約8Kb。RNA有感染性，其5′不戴帽，代之以10KD~15KD蛋白與之結合，RNA 3′端有多聚（A）尾。其外殼為單一的67KD蛋白分子，其前體蛋白為86KD。在受染細胞中發現有5個病毒編碼的蛋白，分子量在29KD~115KD之間，其中115KD和86KD可能是衣殼蛋白的前體蛋白。
諾沃克病毒對熱和酸穩定，對乙醚有抵抗力，在pH2.7的條件下3小時、20%乙醚18~24小時或加熱至60℃30分鍾仍具有傳染性。在氧化銫中的浮力密度為1.34~1.41×103 kg/m3。免疫電鏡下病毒顆粒被抗體包圍，因此多數電鏡照片顯示病毒結構不清。電泳分析僅含單一的蛋白質分子。
諾沃克類病毒的流行病學：目前一般認為諾沃克類病毒的感染是繼輪狀病毒之後的人類腹瀉的第二大病因，廣泛地分布於全世界。主要發生在人群密集區，如醫院病房、飯店、軍艦、集體宿舍等。該病毒常常可以引起成人和年長兒童腸炎的暴發流行，但極少波及嬰幼兒。其傳播方式是通過糞-口途徑傳播，主要是通過污染的水源、食物和人-人密切接觸傳播，表現為：①各年齡組人群、任何季節、任何地點均可發生；②以水型、食物型或人-人傳播；③流行時間長短不一，平均為7天；④發病後72小時約半數病人可檢測出病毒。
1996年4月到1997年3月，我國北京的首都兒科研究所，利用桿狀病毒表達的諾沃克類病毒衣殼蛋白作抗原，對各年齡組的人群諾沃克類病毒的IgG抗體進行了檢測，發現人群中IgG抗體陽性高達89%，其中嬰兒陽性率很高，為99%，7-11月齡兒童最低，為41%，一歲齡升高到65%，三歲齡升高到85%，8-9歲齡兒童為100%。這一調查結果反映了諾沃克類病毒的感染在人群中是很普遍的。
1982年美國紐約州因生食貝類（Shellfish）而暴發了一次胃腸炎的流行，後經調查發現因為病人食用了蚌（Clam）和牡蜊（Oyster）所致；並且在病人糞便和上述貝類標本中同時檢測到了諾沃克類病毒。目前由於生食貝類導致諾沃克類病毒性腸炎已經得到人們的公認，其潛伏期一般為29~32小時，常常於集體食用貝類後暴發，也可呈現散發。
荷蘭學者Win H.M等以及英國、日本學者最近的電鏡和分子生物學研究結果表明：家畜也可能是諾沃克類病毒的儲存宿主。他們分別從養豬場、養雞場、小牛場等取材的家畜糞便中隨機采樣，用人諾沃克類病毒的特異性引物進行RT-PCR檢測，發現有44%的小牛糞便，2%的豬糞便的檢測結果為陽性，同時在電鏡下在一份豬的糞便標本中發現了符合諾沃克病毒形態學特徵的病毒顆粒。並且他們的系列分析的結果表明：人諾沃克類病毒與家畜諾沃克類病毒的同源性較強；他們認為家畜也是諾沃克類病毒的正常宿主，並且人與家畜之間的交叉傳播是可能的，人諾沃克類病毒所致腸炎的流行也有可能來源於動物宿主的機會傳播。
分子生物學的研究結果還表明：人嵌環樣病毒至少可以分成3個基因群GGI、GGII 和GGIII，前二者為諾沃克類病毒（NLV），第三者為札幌類病毒（SLV）。每一個基因群又包括多種變異毒株。這種高度的變異又導致諾沃克類病毒至少有13個基因型；而其中的數種基因型可同時在人群中傳播，並導致人群中腸炎的散發和暴發。然而，大部分的暴發流行通常是由單一基因型的諾沃克類病毒所引起。
諾沃克類病毒的分子生物學：由於缺乏細胞培養體系和動物模型，給諾沃克類病毒的科研工作帶來很大的困難。但在過去的十年，人們對諾沃克病毒的研究還是取得了很大的進展，這主要是分子生物學技術的廣泛引用帶來的結果。國外的學者在這一方面所做的工作很多，到目前為止，他們已經對100多個可得到的毒株進行了序列分析，並且這一數目還在快速增加。分子生物學技術主要應用於以下幾個方面：
（1）利用RT-PCR方法，可以快速擴增病人嘔吐物和糞便以及動物糞便中諾沃克類病毒特異性的基因片段，從而達到快速診斷的目的。同時，還可以利用這一方法檢測家畜，貝類，以辯明其傳播的來源。
（2）通過序列分析，和分子雜交等手段，應用於（前述的）諾沃克病毒的分子流行病學調查，分析本病流行的分子機制，從分子水平上確定其傳播的來源。
（3）利用桿狀病毒等作載體，插入諾沃克類病毒的外衣殼基因，高效表達其衣殼蛋白作抗原，應用於諾沃克病毒病人的流行病學監測。
樣品的收集和處理：主要收集病人嘔吐物和糞便，家畜糞便，以及市售新鮮海產品貝類動物。
本病潛伏期和排毒時間均很短，病人發病24小時糞便排出諾沃克病毒達到高峰，發病72小時以後，即難以檢測出病毒，並且只有1/3~1/2的病人排出病毒。因此，采樣宜於發病後24~48小時內進行。
採集好的樣品（嘔吐物和糞便）以15g/L的濃度溶解於TSB(Trypton Soya Broth)和10%的甘油中，-70℃冰箱保存。
諾沃克類病毒的檢測：
（1）常規血液檢查無確診意義，但對鑒別細菌性腸炎有意義。諾沃克病毒感染時排出病毒的時間短，數量相對較少，故靈敏度低，形態學上亦難以區分，因此電鏡（EM）檢測一般也不可能獲得陽性結果。
（2）免疫電鏡（IEM）：本法較為特異，並且在免疫電鏡下發現符合形態學標准（如大小和形態）的病毒顆粒被Flewett和Doane等人作為確診的依據。應用諾沃克病毒的特異性抗體，在免疫電鏡下檢測人和動物的糞便或嘔吐物，可獲得陽性結果，但通常情況下陽性率較分子生物學的檢測方法低很多。
（3）血清抗體檢測：由於人群中普遍存在著諾沃克病毒的IgG抗體，IgG抗體的檢測沒有診斷意義，但可用於流行病學調查。IgM抗體檢測則文獻未見報道。抗體檢測一般是利用上述桿狀病毒等作載體，高效表達其衣殼蛋白作抗原，然後用酶免疫熒光法（EIAs）進行檢測。
（4）分子生物學檢測：分子生物學的技術和方法，與其他方法相比，有方便快捷的特點。可應用分子生物學的檢測方法對病人嘔吐物或糞便進行篩選，結合免疫電鏡，可確診是否為諾沃克病毒的流行。 預防：可以通過以下幾個方面來預防諾沃克病毒性腸炎：
（1）保持良好的個人衛生習慣，飯前便後要洗手。不生食或未煮熟的貝類等海產品，不飲用生水。 （2）加強食品衛生的監督管理，提高飲水質量，以阻斷其傳播；
（3）病人糞便或嘔吐物污染過的地方要用1∶50的家用漂白水消毒；立即清洗沾染了的衣物。
（4）患者應就醫處理，或逗留家中，以防止傳染他人。