❶ 舉例說明三種柱層析的原理
在生物科學研究中，層析技術被廣泛應用，尤其是蛋白質的分離分析。這里簡要介紹三種常見的柱層析方法。
首先，吸附層析是一種重要的技術，其原理是利用固定相和流動相之間的吸附作用來分離物質。吸附柱層析是通過固體吸附劑與有機溶劑或緩沖液形成柱狀結構來實現的。另一種形式的吸附層析是薄層層析，它使用塗布於玻板或滌綸片上的基質作為固定相，以液體為流動相。聚醯胺薄膜層析則依賴於聚醯胺與被分離物之間形成的氫鍵，這種氫鍵的強弱決定了物質與聚醯胺薄膜間的吸附能力。
接著，離子交換層析涉及離子交換劑作為固定相，通過離子交換反應或吸附作用來分離溶液中的離子或離子化合物。離子交換劑由基質、電荷基團和反離子構成，能夠與溶液中的離子或離子化合物發生反應。
再者，凝膠過濾技術，又稱為分子篩層析，利用凝膠的網狀結構對不同分子量的物質進行分離。當混合溶液通過凝膠過濾層析柱時，溶液中的物質會按照分子量大小進行篩分。
最後，親和層析基於特定配體與目標分子之間的特異性結合。這種技術與酶與底物之間的特異性反應類似，但配體作為固相存在。通過將具有識別能力的配體共價鍵連接到基質上，製成固相載體，從而實現對特定物質的選擇性分離。