『壹』 PCR技術中不需要用DNA限制性內切酶嗎
PCR(聚合酶鏈式反粗槐如應)是利用DNA在體外95度時解旋,35度時引物與單鏈按鹼基互補配對結合,再調明伏溫度至65度左右DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成岩啟互補鏈.
簡單的說PCR就是人工控制的生物體外DNA復制,可大量復制特定的DNA片段.其中用到DNA解旋酶,DNA聚合酶.
限制性內切酶是在基因工程中用到的,它與DNA連接酶的使用目的都是將DNA分子與運載體結合.
『貳』 用PCR技術從DNA中分離並克隆基因需要限制酶進行預處理嗎,為什麼
不需要。
因為部分克隆基因過過程中,在褲碰PCR引物設計拍和的時候已經添加了酶切位點。PCR產物就不用限制酶再酶切處胡賀談理了。
『叄』 目的基因與載體結合需要ATP嗎,那用PCR技術擴增時需要嗎
答案是否定的!酶用的准確就行了。PCR 是擴增DNA的,需要四氏禪種dNTP以及引物扮纖DNA,只要環境溫度達到一廳核仿定條件就行,所以也不需要。酶切質粒是切開一個切口,然後才將需要表達的DNA 片斷加入質粒中。