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什麼是蛋白抽色技術

發布時間:2022-04-17 02:33:46

㈠ 不是說芳碧蛋白抽色祛斑不會紅腫我做了臉怎麼腫老大了

在選擇祛班產品的方式上,主要可以分為內服和外用兩大類。內服產品主要具備三大優勢,一是葯物經過腸胃吸收,從內調節內分泌平衡,徹底打碎黑色素產生的根源。二,對皮膚創傷程度為零。三,不易復發,根據對使用過人群中2000人調查回訪發現復發率為零。
白醋洗臉祛斑一般一個月可以看到效果。
醋洗臉的正確方法:
1、不能直接接觸皮膚
白醋洗臉可以恢復皮膚的光澤和彈性,軟化角質層和美白淡斑。但其實白醋是不能直接和臉部接觸的,一般洗臉時也是在一大盆水中滴幾滴白醋。而且因為白醋的酸性很強,時間久了會破壞角質層,所以白醋也不能經常用。
2、注意使用白醋的量
白醋洗臉,每次只需要一小勺即可,不需要放很多白醋進去,這樣會對皮膚產生刺激性,造成皮膚越來越薄,容易增長細紋,變乾燥。因為皮膚需要一個適應過程,因此,白醋的量最好是少放一點,喝湯的小勺子放一勺子就可以了。
3、注意洗臉的水溫
白醋洗臉,水溫也需要控制好了,白醋本身就是帶有一定活性的液體,過高的水溫會殺滅醋酸中的活性因子,所以只需要使用溫水即可。水溫是洗臉時值得注意的一個重要因素,水溫不要過低也不要過高,大概三四十度就可以了,過高殺滅了醋酸的活性,過低則無法完全清除臉部臟污。
4、白醋柔嫩肌膚
每次洗臉時,放一小盆水,到上一瓶蓋那麼多的醋,倒入水中調勻,撲到臉上,一定要用熱水,醋的有效成分會在熱氣的作用下,滲透進毛囊,而起效。大約5到10分鍾,把臉擦乾即可,什麼都不要用。

㈡ 蛋白質的分離純化技術有哪些

蛋白質的分離純化方法很多,主要有:
(一)根據蛋白質溶解度不同的分離方法
1、蛋白質的鹽析
中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質的溶解度增加,此稱鹽溶;當鹽濃度繼續升高時,蛋白質的溶解度不同程度下降並先後析出,這種現象稱鹽析,將大量鹽加到蛋白質溶液中,高濃度的鹽離子(如硫酸銨的 SO4 和 NH4)有很強的水化力,可奪取蛋白質分子的水化層,使之「失水」,於是蛋白質膠粒凝結並沉澱析出。鹽析時若溶液 pH 在蛋白質等電點則效果更好。由於各種蛋白質分子顆粒大小、親水程度不同,故鹽析所需的鹽濃度也不一樣,因此調節混合蛋白質溶液中的中性鹽濃度可使各種蛋白質分段沉澱。
影響鹽析的因素有:(1)溫度:除對溫度敏感的蛋白質在低溫(4 度)操作外,一般可在室溫中進行。一般溫度低蛋白質溶介度降低。但有的蛋白質(如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白)在較高的溫度(25 度)比 0 度時溶解度低,更容易鹽析。(2)pH 值:大多數蛋白質在等電點時在濃鹽溶液中的溶介度最低。(3)蛋白質濃度:蛋白質濃度高時,欲分離的蛋白質常常夾雜著其他蛋白質地一起沉澱出來(共沉現象)。因此在鹽析前血清要加等量生理鹽水稀釋,使蛋白質含量在 2.5-3.0%。蛋白質鹽析常用的中性鹽,主要有硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉等。 其中應用最多的硫酸銨,它的優點是溫度系數小而溶解度大(25 度時飽和溶液為 4.1M,即 767 克/升;0 度時飽和溶解度為 3.9M,即 676 克/升),在這一溶解度范圍內,許多蛋白質和酶都可以鹽析出來;另外硫酸銨分段鹽析效果也比其他鹽好,不易引起蛋白質變性。硫酸銨溶液的 pH 常在 4.5-5.5 之間,當用其他 pH 值進行鹽析時,需用硫酸或氨水調節。蛋白質在用鹽析沉澱分離後,需要將蛋白質中的鹽除去,常用的辦法是透析,即把蛋白質溶液裝入秀析袋內(常
用的是玻璃紙),用緩沖液進行透析,並不斷的更換緩沖液,因透析所需時間較長,所以最好在低溫中進行。此外也可用葡萄糖凝膠 G-25 或 G-50 過柱的辦法除鹽,所用的時間就比較短。
2、等電點沉澱法
蛋白質在靜電狀態時顆粒之間的靜電斥力最小,因而溶解度也最小,各種蛋白質的等電點有差別,可利用調節溶液的 pH 達到某一蛋白質的等電點使之沉澱,但此法很少單獨使用,可與鹽析法結合用。
3、低溫有機溶劑沉澱法
用與水可混溶的有機溶劑,甲醇,乙醇或丙酮,可使多數蛋白質溶解度降低並析出,此法分辨力比鹽析高,但蛋白質較易變性,應在低溫下進行。
(二)根據蛋白質分子大小的差別的分離方法
1、透析與超濾
透析法是利用半透膜將分子大小不同的蛋白質分開。超濾法是利用高壓力或離心力,強使水和其他小的溶質分子通過半透膜,而蛋白質留在膜上,可選擇不同孔徑的瀘膜截留不同分子量的蛋白質。
2、凝膠過濾法
也稱分子排阻層析或分子篩層析,這是根據分子大小分離蛋白質混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝膠(Sephadex ged)和瓊脂糖凝膠(agarose gel)。
(三)根據蛋白質帶電性質進行分離
蛋白質在不同 pH 環境中帶電性質和電荷數量不同,可將其分開。
1、電泳法
各種蛋白質在同一 pH 條件下,因分子量和電荷數量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開。值得重視的是等電聚焦電泳,這是利用一種兩性電解質作為載體,電泳時兩性電解質形成一個由正極到負極逐漸增加的 pH 梯度,當帶一定電荷的蛋白質在其中泳動時,到達各自等電點的 pH 位置就停止,此法可用於分析和制備各種蛋白質。
2、離子交換層析法
離子交換劑有陽離子交換劑(如:羧甲基纖維素;CM-纖維素)和陰離子交換劑(二乙氨基乙基纖維素;DEAE?FONT FACE="宋體" LANG="ZH-CN">纖維素),當被分離的蛋白質溶液流經離子交換層析柱時,帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質被吸附在離子交換劑上,隨後用改變 pH 或離子強度辦法將吸附的蛋白質洗脫下來。
(四)根據配體特異性的分離方法-親和色譜法
親和層析法(aflinity chromatography)是分離蛋白質的一種極為有效的方法,它經常只需經過一步處理即可使某種待提純的蛋白質從很復雜的蛋白質混合物中分離出來,而且純度很高。這種方法是根據某些蛋白質與另一種稱為配體(Ligand)的分子能特異而非共價地結合。其基本原理:蛋白質在組織或細胞中是以復雜的混合物形式存在,每種類型的細胞都含有上千種不同的蛋白質,因此蛋白質的分離(Separation),提純(Purification)和鑒定(Characterization)是生物化學中的重要的一部分,至今還沒的單獨或一套現成的方法能移把任何一種蛋白質
從復雜的混合蛋白質中提取出來,因此往往採取幾種方法聯合使用。

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㈢ 蛋白質組學主要包括哪些分析技術及各自特點

為探究生物進程的分子機制,需要確定介導這個過程的蛋白質-蛋白質間的相互作用。研究蛋白質間相互作用的主要技術總結如下:一、酵母雙雜交系統酵母雙雜交系統是當前廣泛用於蛋白質相互作用組學研究的一種重要方法。其原理是當靶蛋白和誘餌蛋白特異結合後,誘餌蛋白結合於報道基因的啟動子,啟動報道 基因在酵母細胞內的表達,如果檢測到報道基因的表達產物,則說明兩者之間有相互作用,反之則兩者之間沒有相互作用。將這種技術微量化、陣列化後則可用於大 規模蛋白質之間相互作用的研究。在實際工作中,人們根據需要發展了單雜交系統、三雜交系統和反向雜交系統等。Angermayr等設計了一個SOS蛋白介 導的雙雜交系統。可以研究膜蛋白的功能,豐富了酵母雙雜交系統的功能。此外,酵母雙雜交系統的作用也已擴展至對蛋白質的鑒定。二、噬茵體展示技術在編碼噬菌體外殼蛋白基因上連接一單克隆抗體的DNA序列,當噬菌體生長時,表面就表達出相應的單抗,再將噬菌體過柱,柱上若含目的蛋白,就會與相應抗體 特異性結合,這被稱為噬菌體展示技術。此技術也主要用於研究蛋白質之間的相互作用,不僅有高通量及簡便的特點,還具有直接得到基因、高選擇性的篩選復雜混 合物、在篩選過程中通過適當改變條件可以直接評價相互結合的特異性等優點。目前,用優化的噬菌體展示技術,已經展示了人和鼠的兩種特殊細胞系的cDNA文 庫,並分離出了人上皮生長因子信號傳導途徑中的信號分子。三、等離子共振技術表 面等離子共振技術(Surface Plasmon Resonance,SPR)已成為蛋白質相互作用研究中的新手段。它的原理是利用一種納米級的薄膜吸附上「誘餌蛋白」,當待測蛋白與誘餌蛋白結合後,薄 膜的共振性質會發生改變,通過檢測便可知這兩種蛋白的結合情況。SPR技術的優點是不需標記物或染料,反應過程可實時監控。測定快速且安全,還可用於檢測 蛋白一核酸及其它生物大分子之間的相互作用。………………
詳細資料請參考:on
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㈣ 蛋白質是干什麼用的

蛋白質是一種復雜的有機化合物,舊稱「朊」。組成蛋白質的基本單位是氨基酸,氨基酸通過脫水縮合形成肽鏈。蛋白質是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子,每一條多肽鏈有二十~數百個氨基酸殘基不等;各種氨基酸殘基按一定的順序排列。蛋白質的氨基酸序列是由對應基因所編碼。除了遺傳密碼所編碼的20種「標准」氨基酸,在蛋白質中,某些氨基酸殘基還可以被翻譯後修飾而發生化學結構的變化,從而對蛋白質進行激活或調控。多個蛋白質可以一起,往往是通過結合在一起形成穩定的蛋白質復合物,發揮某一特定功能。產生蛋白質的細胞器是核糖體。
蛋白質(protein)是生命的物質基礎,沒有蛋白質就沒有生命。因此,它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯系在一起的物質。機體中的每一個細胞和所有重要組成部分都有蛋白質參與。蛋白質占人體重量的16.3%,即一個60kg重的成年人其體內約有蛋白質9.8kg。人體內蛋白質的種類很多,性質、功能各異,但都是由20多種氨基酸按不同比例組合而成的,並在體內不斷進行代謝與更新。被食入的蛋白質在體內經過消化分解成氨基酸,吸收後在體內主要用於重新按一定比例組合成人體蛋白質,同時新的蛋白質又在不斷代謝與分解,時刻處於動態平衡中。因此,食物蛋白質的質和量、各種氨基酸的比例,關繫到人體蛋白質合成的量,尤其是青少年的生長發育、孕產婦的優生優育、老年人的健康長壽,都與膳食中蛋白質的量有著密切的關系。 [編輯本段]蛋白質的構成蛋白質是以氨基酸為基本單位構成的生物大分子。 [編輯本段]蛋白質的組成蛋白質是由C(碳)、H(氫)、O(氧)、N(氮)組成,一般蛋白質可能還會含有P、S、Fe(鐵)、Zn(鋅)、Cu、B、Mn、I等。 [編輯本段]蛋白質的性質①具有兩性
蛋白質是由α-氨基酸通過肽鍵構成的高分子化合物,在蛋白質分子中存在著氨基和羧基,因此跟氨基酸相似,蛋白質也是兩性物質。
②可發生水解反應
蛋白質在酸、鹼或酶的作用下發生水解反應,經過多肽,最後得到多種α-氨基酸[1]。
蛋白質水解時,應找准結構中鍵的「斷裂點」,水解時肽鍵
如:蛋白質
nH2N—CH2—COOH
找到「斷裂點」就可以確定蛋白質水解的產物
例如某蛋白質水解
可得三種α-氨基酸,為H2N—CH2—COOH、
③溶水具有膠體的性質
有些蛋白質能夠溶解在水裡(例如雞蛋白能溶解在水裡)形成溶液。具有膠體性質。
蛋白質的分子直徑達到了膠體微粒的大小(10-9~10-7m)時,所以蛋白質具有膠體的性質。
④加入電解質可產生鹽析作用
少量的鹽(如硫酸銨、硫酸鈉等)能促進蛋白質的溶解,如向蛋白質水溶液中加入濃的無機鹽溶液,可使蛋白質的溶解度降低,而從溶液中析出,這種作用叫做鹽析.
這樣鹽析出的蛋白質仍舊可以溶解在水中,而不影響原來蛋白質的性質,因此鹽析是個可逆過程.利用這個性質,採用鹽析方法可以分離提純蛋白質.
⑤蛋白質的變性
在熱、酸、鹼、重金屬鹽、紫外線等作作用下,蛋白質會發生性質上的改變而凝結起來.這種凝結是不可逆的,不能再使它們恢復成原來的蛋白質.蛋白質的這種變化叫做變性.
蛋白質變性後,就失去了原有的可溶性,也就失去了它們生理上的作用.因此蛋白質的變性凝固是個不可逆過程.
造成蛋白質變性的原因
物理因素包括:加熱、加壓、攪拌、振盪、紫外線照射、超聲波等:
化學因素包括:強酸、強鹼、重金屬鹽、三氯乙酸、乙醇、丙酮等。
⑥顏色反應
蛋白質可以跟許多試劑發生顏色反應.例如在雞蛋白溶液中滴入濃硝酸,則雞蛋白溶液呈黃色.這是由於蛋白質(含苯環結構)與濃硝酸發生了顏色反應的緣故.還可以用雙縮脲試劑對其進行檢驗,該試劑遇蛋白質變紫.
⑦蛋白質在灼燒分解時,可以產生一種燒焦羽毛的特殊氣味.

㈤ 試述蛋白質樣品制備技術的原則

1.
避免冷凍乾燥
盡管有一些蛋白是經冷凍乾燥處理後長出了晶體,但是大多數情況下並非如此。所以要盡可能避免冷凍乾燥。如果蛋白已經這樣了,准備點晶體之前,要用水或者緩沖液透析,除掉非揮發性的試劑和其他化學物質。
2.
避免硫酸銨沉澱
避免硫酸銨沉澱法作為純化的最後一步或使用硫酸銨沉澱法來濃縮蛋白。因為硫酸銨很難除干凈,對後續的結晶過程造成干擾。殘存的微量的硫酸銨也會干擾晶體篩選的條件,造成結果的不可重復性。微量的硫酸銨也容易造成樣品沉澱,以及在PEG和鹽類物質存在時會出現過量的晶核。
3.
蛋白批次
在同一次條件篩選時,要避免樣品不是同一批次純化出來的。每一次純化的條件和步驟都是不同的〔就像天下沒有兩片相同的樹葉(Redondo添加)〕,所以篩選的時候應該使用同一批次純化出來的蛋白。
4.
定性蛋白質
在拿去點晶體之前,應該定性判斷你純化出來的蛋白是不是你的目的蛋白。根據確定了的蛋白質性質,可以給篩選和優化提供參考。常用的蛋白質定性試驗包括:
SDS-PAGE
Native
PAGE
Dynamic
Light
Scattering
IEF
(Isoelectric
Focusing)
Gel
Mass
Spectros
根據這些試驗的結果,我們可以判斷:
蛋白樣品的純度
蛋白樣品的同次性
不同批次純化出來的蛋白的性質差異
蛋白質的穩定性
5.
蛋白需要達到什麼純度?
要拿去篩晶體,蛋白樣品需要達到什麼純度?答案是越純越好。但是這樣一個答案不能讓人滿意。如何能更容易理解一些呢?一開始篩選時,根據考馬斯亮藍染色判斷蛋白純度應該達到90

95%。不過,考慮到總有進一步純化的步驟,不可能達到『絕對』的100%純,所以沒有必要追求『絕對』純,存在一點點的雜質蛋白是可以接受的。還要記住,結晶本身就是一個純化過程。當篩選過程中沒有晶體長出,甚至沒有長的跡象,或者在優化條件時不能進一步提高晶體的質量了,這個時候就要考慮進一步提高蛋白濃度了。

㈥ 南韓奶療美白抽色強力組合的效果怎麼樣

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上海名朵化妝品有限公司


產品在使用過程中針對各種皮膚的注意事項

針對油性肌膚的用法




1、取適量潤白洗面奶清潔面部。
2、熱噴霧3-5分鍾。
3、取適量通絡按摩膏按摩面部5-7分鍾。
4、取適量超級皙白調理霜在有斑部位導入2-3分鍾,不用清洗。
5、導入神奇美白露3-5分鍾(夏季直接輕拍至吸收即可)。
6、取適量面膜敷於面部5-10分鍾後起膜,清洗干凈。
7、取適量深度潤膚霜潤膚。

針對乾性肌膚的用法

1、取適量潤白洗面奶清潔面部。
2、噴霧2-3分鍾。
3、取適量通絡按摩膏按摩面部5-7分鍾(角質層薄者可免做)。
4、取適量超級皙白調理霜在有斑部位導入2-3分鍾,不用清洗(角質層薄者可直接輕拍至吸收即可)。
5、導入神奇美白露3-5分鍾(角質層薄者直接輕拍至吸收即可)。
6、取適量面膜敷於面部5-10分鍾,清洗干凈。
7、取適量深度潤膚霜輕拍至吸收即可。

針對敏感性肌膚的用法

1、取適量潤白洗面奶清潔面部。
2、冷噴3-5分鍾。
3、取適量超級皙白調理霜至有斑部位輕拍至吸收。
4、神奇美白露輕拍至吸收。
5、取適量面膜敷於面部5-10分鍾後起膜,清洗干凈。
6、深度潤膚霜潤膚。

斑點產生的原因是什麼?

皮膚分為表皮層、真皮層和皮下組織,在表皮層最底層是基底層細胞,這里有分泌麥拉寧黑色素的麥拉寧細胞。麥拉寧黑色素是如何產生的?在麥拉寧細胞中,存在酪氨酸酶mrosmase,此物質在紫外線的照射下,會被激活,於是刺激酪氨酸酶mrosmase轉化為黑色素。隨後,新增黑色素被包裹在黑色素囊中,被釋放至表皮層細胞中。隨著細胞新陳代謝28天的周期,黑色素會隨細胞向上遷移至表皮層最表面的角質層。如果該處的麥拉寧細胞DNA受到破壞,麥拉寧黑色素會被不斷釋放,最終過量產生,而形成斑點。

本系列產品採用什麼原理祛斑?

本系列產品繼承了中醫傳統的美容配方技術並揉和和高科技的生物乳化技術,通過「透皮給葯」的醫療理論,依靠增進血液循環,增強個體免疫能力,達到自然健康美白的目的!

為什麼有些顧客效果很好,有些人效果較慢或不明顯呢?

對於效果比較慢的人,美容師可與客人溝通以下幾個問題:
①有否肝、脾類病史;
②是否產生使用搭配方法不得當;
③是否女性生理周期;
④飲食、夜生活是否不得當;
⑤是否客人皮膚不吸收、況狀不理想等等。

在使用本品過程中為什麼極少數人會出現輕微的紅?

①客人急於求成,用量可能太多;
②用本品過程中受到陽光強烈照射;
③食用辛辣、海鮮等易發類食品等;
④個別體質對本產品產生的皙時性抗體反應;
⑤在使用本品過程中飲酒,導致因流量快且多,一旦靜冷後,易發生毛細血管充血冷滯造成皙時紅,建議洗熱水澡30分鍾後,再使用該品,否則極易出現上述現象。

潔面、按摩操作過程中如果出現了輕微紅怎麼辦?

首先對照一下是否以下原因:
①按摩時間太長或太用力;
②熱噴溫度太高或噴頭離面部太近;
③本身面部血液較多且血流速度快;
④除角質次數過於頻繁。對照以上原因,可有的放矢的解決。

春天過敏原因多多,本系列產品可以做到功效與修復同時進行嗎?

①季度過敏,空氣中的花粉孢子等致敏源引起的;
②保養不當,致皮膚營養過盛,產生不透;
③空氣乾燥,易脫皮,感染細菌機會增多;
④飲食:春天一些易發蔬菜上市,辛辣多食也引起皮膚易過敏;
⑤春日艷陽,忽略了紫外線的殺傷力;
⑥濃妝及熬夜等原因均會導致肌膚敏感。而溶素霜、潤白霜不單只是一種治療性產品,對日常護膚亦有神奇效果。具有嫩膚、潤膚作用的肌雪嫩膚霜與真白神水等更能輔助,恢復肌膚健康與生機!對修復敏感和預防敏感都達到很好的療效!

為什麼本系列產品不會出現紅、脫皮、反彈等現象?

從產品的葯理配方講,本品應用了具有啟動皮膚自身防疫機制的免疫多糖細胞激活劑。葡霉糖主要存在於植物和活性微生物中,呈平面螺旋細胞,細胞膜的形狀可能引起一系列產體化學變化,從而激活和產生細胞因子、表皮生長因子(EQE)和血管生成因子(AF)。從免疫角度看,激活巨噬細胞啟動免疫級聯,並不斷產生系列白細胞介素、干擾素和細胞促進因子。
組合產品特點:
①激活巨噬細胞,促進膠原蛋白合成,改善皮膚彈性,增加柔潤性;
②幫助受損肌膚復原,抗過敏、消炎;
③調動皮膚自身免疫機制,預防皮脂氧化,消除自由基,恢復肌膚平衡功能。

美容院顧客在使用治療性產品皮膚過敏怎麼辦?

皮膚過敏反應屬於即刻反應型,一般在接觸化妝品15-20分鍾或24小時左右,局部出現皮疹、發紅,並伴有刺痛,瘙癢等感覺,引起過敏反應的原因很多:
①是否自身是過敏體質;
②去角質是否適當;
③蒸汽噴霧時間是否太長;
④是否按摩時間太長,力度太大;
⑤消毒是否徹底;
⑥產品使用是否適合;
⑦在皮膚乾燥缺水的情況下,加上本身的抵抗力較弱,也會產生敏感、發紅現象,因此為了防止由過敏引起的皮膚反應,要求每一次顧客來美容院時,美容師都應該首先對其的皮膚做出全面的觀察,做到這一點,就會避免一些潛在的問題發生;另外,美容師還需要向顧客了解其最近的生活、飲食情況、身體狀況、睡眠是否服葯,生活環境是否有所改變等。當過敏現象發生後,輕者用冷噴噴30分鍾,或冷噴水裡加一些抗敏葯(如地賽米松、撲爾敏)等;口服一點抗敏葯(如息斯敏),三天後,症狀會消退。重者,如有明顯紅腫、潮紅、滲出液或水池,可用3%的硼酸,八層紗布濕敷,每日一次即可。皮膚過敏反應的發生,主要與少數過敏體質有關,因此對每位顧客在護理前要詳細詢問其既往是否有過敏史,是否是過敏體質,對哪些物質過敏等,對有過敏史的人,在選產品時應格外注意,在操作功效型產品時,要隨時掌握顧客的反應,觀察治療中的情況。

在使用產品的同時,如出現皮膚乾燥,發紅或過敏情況,怎麼辦?

①超級皙白調理霜的用量:客人在第一天使用前,要在臉部皮膚的邊緣塗抹少量超級皙白調理霜按摩至吸收,如在24小時後無任何的過敏現象,則第二天可以慢慢的加量,首瓶在25天左右用完。如在使用一周左右出現皮膚乾燥,也屬一個正常的反應;有時在使用一周左右也可能會有一點皮屑出現,因為這是表皮的角質層脫落,是正常的反應,這種情況不會持續很長時間,一般在2-3天左右會消失。在皮膚出現乾燥的情況下,可以在使用超級皙白調理霜時,每天晚間先用深度潤膚霜薄薄的打一層底,等其吸收以後再塗上超級皙白調理霜,待症狀消失後,可再恢復正常使用。

②發紅現象:在使用本產品時出現紅的現象,有兩種可能:
1)可能在剛使用產品時,不太適應產品的萬分,在使用第一次會出紅,屬正常現象,待客人停用2-3天後繼續使用,一般情況下是不會再出現這個情況的(特別敏感的例外);
2)用了超級皙白調理霜以後,客人臉部血液循環加快,有效成分被吸收,出現輕微的紅,這也屬正常。

為什麼本系列產品安全高效無依賴?

是因為基於科學機理研究的,並經多年的臨床實踐,不斷調整葯物含量,從極限環境下生存的生活活體中分離出活性細胞酵素活性菌。配合多種細胞生長因子(BFGF)生物活性素(EQF)及生物信息輸導因子所擁有的強大的抗氧作用,對「三酶一素」完全達到分解抑制的作用,獨創生物活細胞,祛斑美白原理,真正實現祛斑美白無依賴,安全高效。


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㈦ 蛋白質分離分析技術常用的有哪幾種

1、鹽析與有機溶劑沉澱:在蛋白質溶液中加入大量中性鹽,以破壞蛋白質的膠體性質,使蛋白質從溶液中沉澱析出,稱為鹽析.常用的中性鹽有:硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等.鹽析時,溶液的pH在蛋白質的等電點處效果最好.凡能與水以任意比例混合的有機溶劑,如乙醇、甲醇、丙酮等,均可引起蛋白質沉澱.
2、電泳法:蛋白質分子在高於或低於其pI的溶液中帶凈的負或正電荷,因此在電場中可以移動.電泳遷移率的大小主要取決於蛋白質分子所帶電荷量以及分子大小.
3、透析法:利用透析袋膜的超濾性質,可將大分子物質與小分子物質分離開.
4、層析法:利用混合物中各組分理化性質的差異,在相互接觸的兩相(固定相與流動相)之間的分布不同而進行分離.主要有離子交換層析,凝膠層析,吸附層析及親和層析等,其中凝膠層析可用於測定蛋白質的分子量.
5、分子篩:又稱凝膠過濾法,蛋白質溶液加於柱之頂部,任其往下滲漏,小分子蛋白質進入孔內,因而在柱中滯留時間較長,大分子蛋白質不能進入孔內而徑直流出,因此不同大小的蛋白質得以分離.
6、超速離心:利用物質密度的不同,經超速離心後,分布於不同的液層而分離.超速離心也可用來測定蛋白質的分子量,蛋白質的分子量與其沉降系數S成正比.

㈧ 蛋白純化的原理是什麼

蛋白質分離純化常用方法有: 1、沉澱, 2、電泳:蛋白質在高於或低於其等電點的溶液中是帶電的,在電場中能向電場的正極或負極移動。根據支撐物不同,有薄膜電泳、凝膠電泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白質與小分子化合物分開的方法。4、層析: a.離子交換層析,利用蛋白質的兩性游離
蛋白質的分離純化在生物化學研究應用中使用廣泛,是一項重要的操作技術。 一個典型的真核細胞可以包含數以千計的不同蛋白質,一些含量十分豐富,一些僅含有幾個拷貝。為了研究某一個蛋白質,必須首先將該蛋白質從其他蛋白質和非蛋白質分子中純化出來。利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質的污染,而利用各蛋白質的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學活性都會有差異,利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來得到重組蛋白。
蛋白的純化大致分為粗分離階段和精細純化階段二個階段。一般蛋白純化採用的方法為樹脂法。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細胞成分如DNA、RNA等分開,由於此時樣本體積大、成分雜,要求所用的樹脂高容量、高流速、顆粒大、粒徑分布寬.

㈨ 蛋白質分離純化的蛋白質分離純化技術

沉澱法也稱溶解度法。其純化生命大分子物質的基本原理是根據各種物質的結構差異性來改變溶液的某些性質,進而導致有效成分的溶解度發生變化。
1、鹽析法
鹽析法的根據是蛋白質在稀鹽溶液中,溶解度會隨鹽濃度的增高而上升,但當鹽濃度增高到一定數值時,使水活度降低,進而導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和,水化膜逐漸被破壞,最終引起蛋白質分子間互相凝聚並從溶液中析出。
2、有機溶劑沉澱法
有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因有二:其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用;其二、有機溶劑的介電常數比水小,導致溶劑的極性減小。
3、蛋白質沉澱劑
蛋白質沉澱劑僅對一類或一種蛋白質沉澱起作用,常見的有鹼性蛋白質、凝集素和重金屬等。
4、聚乙二醇沉澱作用
聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質發生沉澱作用。
5、選擇性沉澱法
根據各種蛋白質在不同物理化學因子作用下穩定性不同的特點,用適當的選擇性沉澱法,即可使雜蛋白變性沉澱,而欲分離的有效成分則存在於溶液中,從而達到純化有效成分的目的。 1、吸附柱層析
吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相,以有機溶劑或緩沖液為流動相構成柱的一種層析方法。
2、薄層層析
薄層層析是以塗布於玻板或滌綸片等載體上的基質為固定相,以液體為流動相的一種層析方法。這種層析方法是把吸附劑等物質塗布於載體上形成薄層,然後按紙層析操作進行展層。
3、聚醯胺薄膜層析
聚醯胺對極性物質的吸附作用是由於它能和被分離物之間形成氫鍵。這種氫鍵的強弱就決定了被分離物與聚醯胺薄膜之間吸附能力的大小。層析時,展層劑與被分離物在聚醯胺膜表面競爭形成氫鍵。因此選擇適當的展層劑使分離在聚醯胺膜表面發生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的連續過程,就能導致分離物質達到分離目的。 親和層析的原理與眾所周知的抗原-抗體、激素-受體和酶-底物等特異性反應的機理相類似,每對反應物之間都有一定的親和力。正如在酶與底物的反應中,特異的底物(S)才能和一定的酶(E)結合,產生復合物(E-S)一樣。在親和層析中是特異的配體才能和一定的生命大分子之間具有親和力,並產生復合物。而親和層析與酶-底物反應不同的是,前者進行反應時,配體(類似底物)是固相存在;後者進行反應時,底物呈液相存在。實質上親和層析是把具有識別能力的配體L(對酶的配體可以是類似底物、抑制劑或輔基等)以共價鍵的方式固化到含有活化基團的基質M(如活化瓊脂糖等)上,製成親和吸附劑M-L,或者叫做固相載體。而固化後的配體仍保持束縛特異物質的能力。因此,當把固相載體裝人小層析柱(幾毫升到幾十毫升床體積)後,讓欲分離的樣品液通過該柱。這時樣品中對配體有親和力的物質S就可藉助靜電引力、范德瓦爾力,以及結構互補效應等作用吸附到固相載體上,而無親和力或非特異吸附的物質則被起始緩沖液洗滌出來,並形成了第一個層析峰。然後,恰當地改變起始緩沖液的pH值、或增加離子強度、或加入抑制劑等因子,即可把物質S從固相載體上解離下來,並形成了第M個層析峰。顯然,通過這一操作程序就可把有效成分與雜質滿意地分離開。如果樣品液中存在兩個以上的物質與固相載體具有親和力(其大小有差異)時,採用選擇性緩沖液進行洗脫,也可以將它們分離開。用過的固相載體經再生處理後,可以重復使用。
上面介紹的親和層析法亦稱特異性配體親和層析法。除此之外,還有一種親和層析法叫通用性配體親和層析法。這兩種親和層析法相比,前者的配體一般為復雜的生命大分子物質(如抗體、受體和酶的類似底物等),它具有較強的吸附選擇性和較大的結合力。而後者的配體則一般為簡單的小分子物質(如金屬、染料,以及氨基酸等),它成本低廉、具有較高的吸附容量,通過改善吸附和脫附條件可提高層析的解析度。 聚焦層析也是一種柱層析。因此,它和另外的層析一樣,照例具有流動相,其流動相為多緩沖劑,固定相為多緩沖交換劑。
聚焦層析原理可以從pH梯度溶液的形成、蛋白質的行為和聚焦效應三方面來闡述。
1、PH梯度溶液的形成
在離子交換層析中,pH梯度溶液的形成是靠梯度混合儀實現的。例如,當使用陰離子交換劑進行層析時,制備pH由高到低呈線性變化的梯度溶液的方法是,在梯度儀的混合室中裝高pH溶液,而在另一室裝低pH極限溶液,然後打開層析柱的下端出口,讓洗脫液連續不斷地流過柱體。這時從柱的上部到下部溶液的pH值是由高到低變化的。而在聚焦層析中,當洗脫液流進多緩沖交換劑時,由於交換劑帶具有緩沖能力的電荷基團,故pH梯度溶液可以自動形成。例如,當柱中裝陰離子交換劑PBE94(作固定相)時,先用起始緩沖液平衡到pH9,再用含pH6的多緩沖劑物質(作流動相)的淋洗液通過柱體,這時多緩沖劑中酸性最強的組分與鹼性陰離子交換對結合發生中和作用。隨著淋洗液的不斷加入,柱內每點的pH值從高到低逐漸下降。照此處理J段時間,從層析柱頂部到底部就形成了pH6~9的梯度。聚焦層析柱中的pH梯度溶液是在淋洗過程中自動形成的,但是隨著淋洗的進行,pH梯度會逐漸向下遷移,從底部流出液的pH卻由9逐漸降至6,並最後恆定於此值,這時層析柱的pH梯度也就消失了。
2、蛋白質的行為
蛋白質所帶電荷取決於它的等電點(PI)和層析柱中的pH值。當柱中的pH低於蛋白質的PI時,蛋白質帶正電荷,且不與陰離於交換劑結合。而隨著洗脫劑向前移動,固定相中的pH值是隨著淋洗時間延長而變化的。當蛋白質移動至環境pH高於其PI時,蛋白質由帶正電行變為帶負電荷,並與陰離子交換劑結合。由於洗脫劑的通過,蛋白質周圍的環境pH 再次低於PI時,它又帶正電荷,並從交換劑解吸下來。隨著洗脫液向柱底的遷移,上述過程將反復進行,於是各種蛋白質就在各自的等電點被洗下來,從而達到了分離的目的。
不同蛋白質具有不同的等電點,它們在被離子交換劑結合以前,移動之距離是不同的,洗脫出來的先後次序是按等電點排列的。
3、聚焦效應
蛋白質按其等電點在pH梯度環境中進行排列的過程叫做聚焦效應。pH梯度的形成是聚焦效應的先決條件。如果一種蛋白質是加到已形成pH梯度的層析柱上時,由於洗脫液的連續流動,它將迅速地遷移到與它等電點相同的pH處。從此位置開始,其蛋白質將以緩慢的速度進行吸附、解吸附,直到在等電點pH時被洗出。若在此蛋白質樣品被洗出前,再加入第二份同種蛋白質樣品時,後者將在洗脫液的作用下以同樣的速度向前移動,而不被固定相吸附,直到其遷移至近似本身等電點的環境處(即第一個作品的緩慢遷移處)。然後兩份樣品以同樣的速度遷移,最後同時從柱底洗出。事實上,在聚焦層析過程中,一種樣品分次加入時,只要先加入者尚未洗出,並且有一定的時間進行聚焦,剩餘樣品還可再加到柱上,其聚焦過程都能順利完成,得到的結果也是滿意的。 多種組分的混合樣品進入色譜儀的氣化室氣化後呈氣態。當載氣流入時,氣化的物質被帶人色譜柱內,在固定相和流動相中不斷地進行分配.在理想狀態下,溶質於氣-液兩相間的分配可用分配系數Kg描述。當分配系數小時,溶質在柱中就停留時間短,也即滯留因子(Rf)大,所以它將首先從色譜柱流出而進入鑒定器,經放大系統放大後,輸出訊號便在記錄儀中自動記錄下來,這時呈現的圖形為色譜圖,亦稱色譜峰;當分配系數大時,溶質在柱中停留時間就長,其色譜圖在記錄儀上後出現。由於不同物質有不同的分配系數,所以將一混合樣品通過氣-液色譜柱時,其所含組分就可得到分離。
氣相色譜柱效率高、解析度強的重要原因是,理論塔板數(N)大。毛細管氣相色譜的N可達105~6。增加理論塔板數和降低樣品組分的不同分子在展層中擴展程度(速率理論),就可明顯地提高柱效。以下將討論塔板理論和速率理論對柱效的影響:
1、塔板理論
塔板理論是將色譜假設為一個蒸餾塔,塔內存在許多塊塔板,樣品各組分在每塊塔板的液相和氣相間進行分配,在柱內塔板間高度H(即理論塔板高度)一定時,在有效范圍內,柱子越長,N也就越大,樣品各組分分配次數也就越多,解析度自然提高;若柱長一定時,塔板理論高度H越小,就越能增加樣品各組分的分配次數,進而提高其解析度。因此 N=L/H 在線性分配和忽略塔板間縱向擴散的條件下,根據樣品組分的保留時間tr、峰寬W或半峰高寬度2ΔXi,Martin導出了計算N的公式,樣品組分峰寬度值越小,理論塔板數越高。實際上,進行色譜分析時,峰寬度值的大小是衡量解析度高低的一個尺度。
2、速率理論
根據塔板理論,在H(塔板理論高度)一定時,增加柱長可以提高柱效。但是,柱子過長,將會延長分析時間,降低檢測的靈敏度。所以實踐中應設法降低H,提高柱效。
速率理論主要是分析同一樣品的不同分子,在色譜柱中遷移速度差異所引起色譜峰的擴張程度。而渦流擴散、縱向分子擴散和質量傳遞(包括流動相傳質和固定相傳質)等因子與速率理論值(H)的密切關系可用下面的公式表示:
H=A+B/U+C
渦流擴散(A)是由於樣品組分隨著流動相的移動通過固定相顆粒不均勻的色譜柱時,引起同一組分的不同分子在流動相中形成不規則的"渦流",致使色譜峰變寬、柱效降低。如固定相顆粒均勻、直徑小時,則可降低"渦流"現象發生。
縱向擴散(B/U)亦稱分子擴散項。縱向擴散與樣品分子在色譜柱中的流暢程度(有無阻礙)、流動相的速度(U)等因子有關。因此,降低溶質在流動相中擴散系數和縮短溶質在流動相中停留時間,均可降低縱向擴散。
傳質阻力(C):溶質分子在氣相與氣液界面進行交換所受的阻力,以及在進入固定相液膜傳遞的差異性統稱傳質阻力。傳質阻力分別與固定相顆粒直徑的平方和固定相液膜厚度成正比關系。 高效液相色譜按其固定相的性質可分為高效凝膠色譜、疏水性高效液相色譜、反相高效液相色譜、高效離子交換液相色譜、高效親和液相色譜以及高效聚焦液相色譜等類型。用不同類型的高效液相色譜分離或分析各種化合物的原理基本上與相對應的普通液相層析的原理相似。其不同之處是高效液相色譜靈敏、快速、解析度高、重復性好,且須在色譜儀中進行。
高效液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統,下面將分別敘述其各自的組成與特點。
1、進樣系統
一般採用隔膜注射進樣器或高壓進樣器完成進樣操作,進樣量是恆定的。這對提高分析樣品的重復性是有益的。
2、輸液系統
該系統包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l.47~4.4×107Pa,流速可調且穩定,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動速度,這對提高解析度、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存和梯度儀,可使流動相隨固定相和樣品的性質而改變,包括改變洗脫液的極性、離子強度、pH值,或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(即使僅有一個基團的差別或是同分異構體)都能獲得有效分離。
3、分離系統
該系統包括色譜柱、連接管和恆溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm(需要兩根連用時,可在二者之間加一連接管),內徑為2~5mm,由"優質不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料製成,住內裝有直徑為5~10μm粒度的固定相(由基質和固定液構成)。固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或硅膠構成,它們都有惰性(如硅膠表面的硅酸基團基本已除去)、多孔性(孔徑可達1000?)和比表面積大的特點,加之其表面經過機械塗漬(與氣相色譜中固定相的制備一樣),或者用化學法偶聯各種基團(如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機化合物。因此,這類固定相對結構不同的物質有良好的選擇性。例如,在多孔性硅膠表面偶聯豌豆凝集素(PSA)後,就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來。
另外,固定相基質粒小,柱床極易達到均勻、緻密狀態,極易降低渦流擴散效應。基質粒度小,微孔淺,樣品在微孔區內傳質短。這些對縮小譜帶寬度、提高解析度是有益的。根據柱效理論分析,基質粒度小,塔板理論數N就越大。這也進一步證明基質粒度小,會提高解析度的道理。
再者,高效液相色譜的恆溫器可使溫度從室溫調到60C,通過改善傳質速度,縮短分析時間,就可增加層析柱的效率。
4、檢測系統
高效液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。
(1)紫外檢測器
該檢測器適用於對紫外光(或可見光)有吸收性能樣品的檢測。其特點:使用面廣(如蛋白質、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用);靈敏度高(檢測下限為10-10?g/ml);線性范圍寬;對溫度和流速變化不敏感;可檢測梯度溶液洗脫的樣品。
(2)示差折光檢測器
凡具有與流動相折光率不同的樣品組分,均可使用示差折光檢測器檢測。目前,糖類化合物的檢測大多使用此檢測系統。這一系統通用性強、操作簡單,但靈敏度低(檢測下限為10-7?g/ml),流動相的變化會引起折光率的變化,因此,它既不適用於痕量分析,也不適用於梯度洗脫樣品的檢測。
(3)熒光檢測器
凡具有熒光的物質,在一定條件下,其發射光的熒光強度與物質的濃度成正比。因此,這一檢測器只適用於具有熒光的有機化合物(如多環芳烴、氨基酸、胺類、維生素和某些蛋白質等)的測定,其靈敏度很高(檢測下限為10-12~10-14?g/ml),痕量分析和梯度洗脫作品的檢測均可採用。
(5)數據處理系統
該系統可對測試數據進行採集、貯存、顯示、列印和處理等操作,使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開展。

㈩ 什麼是免疫蛋白印跡(WB)試驗

免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Western blotting),是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法.該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術.由於免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現已成為蛋白分析的一種常規技術.免疫印跡常用於鑒定某種蛋白,並能對蛋白進行定性和半定量分析.結合化學發光檢測,可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異.

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