Ⅰ pcr技術的原理是什麼
PCR技術的基本原理類似於DNA天然復制的一個過程,pcr技術的特異性主要是依賴於與靶序列的寡核苷酸引物。PCR技術其實是一種體外的DNA 產生擴增的技術,是在模板DNA、引物和4種脫氧核苷酸存在的條件下,依賴於DNA聚合酶的酶促合反應,將需要被擴增的DNA片段與其兩側互補的寡核苷酸鏈引物經過一系列反應的多次循環,然後使DNA的片段在數量上可以增加,從而就可以在較短的時間內獲得我們所需的特定的基因片段。
(1)pcr技術從哪裡來擴展閱讀:
Pcr技術具有特異性強、靈敏度高、簡便快速、純度要求低等特點。PCR產物的生成量是以指數方式增加的,PCR的靈敏度可達3個RFU;在細菌學中最小檢出率為3個細菌。PCR反應用耐高溫的聚合酶,一般在2-4 小時就可以完成擴增反應。而且不需要分離病毒或者是細菌及培養細胞等過程,DNA的粗製品以及RNA均可以作為擴增的模板。而且可直接用臨床的標本如血液、洗嗽液、毛發、活組織等DNA的擴增檢測。
Ⅱ PCR技術的原理是什麼
PCR技術的基本原理:
該技術是在模板DNA、引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下,依靠於DNA聚合酶的酶促合成反應。DNA聚合酶以單鏈DNA為模板,藉助一小段雙鏈DNA來啟動叢神搜合成,通過一個或兩個人工合成的寡核苷酸引物與單鏈DNA模板中的一段互補序列結合,形成部分雙鏈。
在適宜的溫度和環境下,DNA聚合酶將脫氧單核苷酸加到引物3´-OH末端,滲歷並以此為起始點,沿模板5´→3´方向瞎純延伸,合成一條新的DNA互補鏈。
PCR技術的應用:
PCR技術首次臨床應用就是從檢測鐮狀細胞和β-地中海貧血的基因突變開始的。
PCR在醫學檢驗學中最有價值的應用領域就是對感染性疾病的診斷。理論上,只要樣本有一個病原體存在,PCR就可以檢測到。
PCR技術不但能有效的檢測基因的突變,而且能准確檢測癌基因的表達量,可據此進行腫瘤早期診斷、分型、分期和預後判斷。
Ⅲ 什麼是PCR技術
PCR技術也就是基因擴咐嫌增技術,它是通過基因擴增儀,在細胞外進行DNA復制,由1個DNA分子增加到2個,然後依次增加到4個,8個…,使分子數目呈幾何級數增加,以在短時間內獲得足夠的DNA,供研究用的一種技術。
PCR技術的出現,使生物學的研究一大突破。在PCR技術問世之前,人們無法查出愛滋病病毒感染者,因為這種病毒在感染者體內的含量很少,衡橘手且難於培養。在PCR技術問世之後,可將愛滋病病毒的核酸進行擴增從而查出受感染者,並可研究治療方法。
PCR技術已經在分子生物學中發揮了重要作用。可以預知,它在遺傳病診斷、治療,在動、植物育種,以及在司法破案等方面,將會發揮更大的作用伍清。
Ⅳ PCR技術的原理是什麼
PCR(聚合酶鏈式反應)是利友坦沒用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常好納是60°C左右)時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶最適反應溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。基於聚合酶製造的PCR儀實際就是一個溫控設備,能在變性溫度,復性溫度,延伸溫度之間很好地進行控制。
知識拓展:
聚合酶鏈式反應是一種用於放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點,是能將微量的DNA大幅增加。因此,無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸,還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液,只要能分離出一丁點的DNA,就能用PCR加以放大,進行比對。
這也是"微量證據"的威力之所在。由1983年美國Mullis首先提出設想,1985年由其發明了聚合酶鏈反應,即簡易DNA擴增信孫法,意味著PCR技術的真正誕生。到如今2013年,PCR已發展到第三代技術。1973 年,台籍科學家錢嘉韻,發現了穩定的Taq DNA聚合酶,為PCR技術發展也做出了基礎性貢獻。