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分子技術有哪些

發布時間:2022-03-15 23:00:21

1. 分子標記技術有哪些

DNA分子標記技術
SSR分子標記技術
AFLP分子標記技術

2. 分子遺傳學研究技術有哪些

醫學遺傳學醫學分子遺傳學研究技術重組DNA技術分子雜交PCR技術及應用基因定位基因克隆重組DNA技術過程包括構建,轉化,擴增(克隆),分離和檢測等.

3. 什麼是分子技術

分子技術 就是將食材分解 然後重新組合 用視覺去欺騙食客! 比如分子魚子醬,它其實不是魚子醬 是用海藻酸鈉 和鈣粉 做成的! 中國的豆腐就是典型的分子技術

4. 分子細胞生物學實驗技術有哪些

建議你參考一下《細胞生物學實驗技術》 章靜波、黃東陽、 方瑾 化學工業出版社 (2006-06出版) 這本書還是不錯的,另外外文社也引進過國外的細胞生物學實驗技術,你也可以參考一下,好象是四本很厚的書,那個非常的全面。如果還不夠的話,可以去冷泉港實驗室的網站上下載他們出的protocal,那個肯定是相當的權威也是非常的實用

5. DNA分子標記技術有哪幾類要說出它們各

分子標記大多以電泳譜帶的形式表現, 大致可分為三大類。
第一類是以分子雜交為核心的分子標記技術, 包括:(1) 限制性片段長度多態性標記(Restriction fragment length polymorphism, 簡稱 RFLP 標記); (2) DNA 指紋技術(DNA Fingerprinting); (3) 原位雜交(in situ hybridization) 等;
第二類是以 PCR 反應為核心的分子標記技術, 包括:(1) 隨機擴增多態性 DNA 標記(Random amplification polymorphism DNA, 簡稱 RAPD 標記); (2) 簡單序列重復標記(Simple sequence repeat, 簡稱 SSR 標記) 或簡單序列長度多態性(Simple sequence length polymorphism, 簡稱 SSLP 標記); (3) 擴展片段長度多態性標記(Amplified fragment length polymorphism, 簡稱 AFLP 標記); (4) 序標位(Sequence tagged sites, 簡稱 STS 標記); (5) 序列特徵化擴增區域(Sequence charactered amplified region, 簡稱 SCAR 標記) 等;
第三類是一些新型的分子標記,如: (1) 單核苷酸多態性(Single nuleotide polymorphism, 簡稱 SNP 標記); (2) 表達序列標簽(Expressed sequences tags, 簡稱 EST 標記) 等。

6. 分子生物學實驗技術都有哪些

PCR 分子克隆 核酸電泳、瓊脂糖凝膠電泳 測序 DNA, RNA 提取 轉化外源DNA 體外轉錄、逆轉錄 cDNA文庫構建 原位雜交、酵母雙雜交、差減雜交、扣除雜交 藍白斑篩選、抗生素篩選 基因工程技術大部分都是依據分子生物學原理設計出來的。

7. 分子生物學技術的分類

目前,常用的分子生物學技術有如下幾種 : PCR- 單鏈構象多態性分析(PCR- single strand conformation analysis,PCR- SSCP) 是近年來在基因突變檢測中運用最廣泛的方法之一。PCR- SSCP 技術憑借突變可引起單鏈DNA三級構象改變,通過觀察單鏈DNA在非變性聚丙烯醯胺凝膠中的遷移率漂移來判斷突變。樣品經PCR 擴增後,其產物經變性後可以產生2 條單鏈,如果存在基因突變,哪怕是一個鹼基的異常,單鏈的構象也會發生變化,正常與突變的DNA單鏈在聚丙烯醯胺凝膠電泳(PAGE) 中,可以顯現出不同的帶型,從而確定野生型和突變型,PCR- SSCP 分析的主要優點是簡易且敏感性較高。但是該技術不能確定突變的部位和性質。PCR- SSCP 突變檢測敏感性隨PCR 產物長度的增加而降低,一般用於檢測較小外顯子的突變。有時由於單個核苷酸變化所引起的構象改變很小,用PAGE 電泳就可能無法檢出,在PCR 產物或待測DNA 小於200 bp 時,PCR- SSCP 分析能夠檢測出70%~ 95%的突變。如果以毛細管電泳代替PAGE,則可大為提高突變檢測的效率。
Wallace1997 年提出將PCR- SSCP 和異源DNA雙鏈分析(heteroplex analysis,HA) 相結合,稱之為SSCP/ HA,部分PCR 產物經變性進行SSCP 分析以了解是否具有突變,其餘PCR 產物直接用於電泳,以檢出含有突變的異源DNA雙鏈,電泳凝膠經銀染,單鏈DNA所形成的帶為橘黃或棕色,而雙鏈DNA則表現為灰黑色。該綜合手段可以單鏈構型多態性和異源雙鏈構型分析兩個不同的層次檢出突變,是一種經濟、迅速的突變檢測手段,但無法提供突變位置的信息。
PCR- SSCP 有許多改進技術,如RNA單鏈構象多態性法(PCR- rSSCP)、雙脫氧測序單鏈片段構象多態分析(PCR- ddF)、限制酶指紋技術(PCR- REF) 等。PCR- rSSCP 法依據RNA構象對單個鹼基替代更敏感的原理,在PCR 引物上加上某類啟動子,通過轉錄的RNA構象體的電泳遷移差異進行突變鑒別。PCR- ddF 法把PCR 產物轉錄,將轉錄物用反轉錄酶進行Sanger 雙脫氧終止測序反應,通過觀察非變性膠上經解鏈處理所產生的單鏈漂移、突變後終止片段的獲得與缺失來判斷突變。PCR- REF 法將RFLP 和SSCP 技術優勢組合,將PCR 擴增的待測片段用5~ 6 種限制酶依次消化,混合並進行末端標記,最後經變性處理並在非變性凝膠上電泳分離,從而獲得來自片段長度和片段構象的雙重突變信息。 變性梯度凝膠電泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE) 利用由鹼基序列所決定的DNA片段溶解度或變性度的差異,達到分離野生型與突變型DNA片段的目的,該手段解析度達一個鹼基。當DNA 雙鏈沿變性劑濃度梯度增加的聚丙烯醯胺凝膠遷移時,DNA分子中解鏈溫度(Tm) 低的部分逐漸變性解鏈。一般總是錯配鹼基部分的異源雙鏈Tm最低,最容易解鏈,其次是富含AT 鹼基對的部位,富含GC鹼基對的部位Tm值較高所以解鏈較難。因此,正常DNA雙鏈和異源雙鏈在梯度變性膠中電泳時,異源雙鏈總是先解鏈。將PCR 產生的雙鏈DNA在濃度遞增的尿素和甲醯胺變性聚丙烯醯胺凝膠上電泳,當某一DNA片段遷移到變性劑濃度與其最低Tm相當的位置時,該片段低溫解鏈部分的雙鏈打開,部分解鏈導致DNA遷移速度明顯下降,觀察樣品的遷移率變化即可判斷是否存在變異。DGGE 敏感性高,即便異源雙鏈中僅含一個錯配鹼基,在電泳時也可分辨其遷移率的改變。DGGE 方法的單鹼基突變檢出率在DNA片段長度600 bp 以內可以達到95%。
DGGE 的成功有賴於雙鏈DNA內部低溫解鏈部分變性後遷移率的改變。但在相當於最高Tm的變性劑濃度的位置,相應的DNA片段可能全部解鏈,使試驗無法檢出存在於高Tm DNA片段中的鹼基替換。為了解決此問題,可以在一個PCR 引物的5 ' 端設計一段富含GC的尾巴,從而使PCR 擴增產物的一端富含GC 鹼基對,保證了絕大多數DNA片段不會發生完全解鏈,在最高變性劑濃度區域仍然可以分辨出部分解鏈的異源雙鏈,這一改進使DGGE 的突變檢出率接近100%,但DGGE 只能檢測突變是否存在而不能確定突變的位置。
DGGE 方法需要設計特定片段最佳的PCR引物以及最佳變性條件,這一過程比較復雜,梯度變性膠的制備需要的設備較昂貴,所以在常規實驗室不易實施。 等位基因特異性擴增法(allele- specific amplificarion,ASA) 是基於PCR技術的一種單核苷酸突變檢測法,是分析已知鹼基替代或微小片段缺失和插入型突變的常規技術。在PCR 的引物設計中,根據已知突變位點性質在引物3 ' 端或中間設計一錯配鹼基,使之僅能與突變型或野生型基因互補而只擴增突變型或野生型基因。
ASA技術只需一步PCR反應,甚至無需電泳和標記技術。因其快速,重復性強,耗資少,無同位素污染以及高效性等特點,將成為有前途的適應於人群大規模突變篩查的方法。應用該方法最好避免錯配鹼基為G: T,這種錯配可能引發擴增反應。 化學裂解錯配鹼基法(chemical cleavage mismatch,CCM) 通過化學修飾並切割異源DNA雙鏈中錯配鹼基,達到檢測點突變的目的。其原理是末端標記的DNA片段暴露於可以識別並修飾異源雙鏈中錯配鹼基的化學試劑中(如錯配的胞嘧啶可被羥胺修飾,錯配的胸腺嘧啶可被四氧化鋨修飾),被修飾的位點隨即可被雜氮環已烷等化學物質裂解。DNA修飾裂解後,電泳觀察DNA片段長度即可知道突變是否存在。該技術較其他突變檢測系統有更多的優越性,可以掃描1~ 2 kb 的大片段DNA並在隨後的順序分析中定位突變位點,其效率可達100%。該手段通常首先對目標DNA和野生型DNA進行PCR 擴增,然後對野生型DNA擴增片段進行末端標記,標記片段作為探針與目標序列復性形成異源雙鏈,用四氧化鋨(OsO4) 或羥胺(hydroxylamine) 修飾並用哌啶(piperidine) 切割,聚丙烯醯胺電泳分離不同長度的片段。近年來,有人採用碳化二亞胺作為錯配修飾劑,進一步提高了該方法的敏感性。CCM方法最初採用同位素DNA片段,用熒游標記代替同位素後,稱之為熒光化學裂解錯配鹼基法(FCCM),該方法依然比較敏感並且安全,可檢出95%~ 100%的錯配。化學裂解錯配鹼基法的不足之處在於工作量大,需要使用有害化學物質作為試驗用試劑。

8. 分子生物學的技術有哪些 原理

隨著生命科學和化學的不斷發展,人們對生物體的認知已經逐漸深入到微觀水平。從單個的生物體到器官到組織到細胞,再從細胞結構到核酸和蛋白的分子水平,人們意識到可以通過檢測分子水平的線性結構(如核酸序列),來橫向比較不同物種,同物種不同個體,同個體不同細胞或不同生理(病理)狀態的差異。這就為生物學和醫學的各個領域,提供了一個強有力的技術平台。
分子生物學技術:可應用於遺傳性疾病的研究和病原體的檢測及腫瘤的病因學、發病學、診斷和治療等方面的研究提高到了基因分子水平。
生物學定義:生物學是研究生命現象和生物活動規律的科學。
據研究對象分為動物學、植物學、微生物學、古生物學等;依研究內容,分為分類學、解剖學、生理學、細胞學、分子生物學、遺傳學、進化生物學、生態學等;從方法論分為實驗生物學與系統生物學等體系。

9. 分子生物學檢驗技術主要包括哪些技術

分子生物學檢驗技術:是以核酸或蛋白質為分析材料,通過分析基因的結構、表達的變化和由此而導致的基因功能的改變,為疾病的研究和診斷提供更准確、更科學的信息和依據的一門學科。

10. 現代分子生物學常用實驗室技術有哪些

把一種生物的某個基因,用生物技術的方法轉入到另一種生物的基因組中,培育出的轉基因生物,就有可能表現出轉入基因所控制的性狀,這項技術叫做轉基因技術.1982年,美國科學家培育出超級鼠這項技術,是利用改變鼠基因的方法,讓鼠的性狀發生變異.因此美國科學家培育的超級鼠是利用了轉基因技術.故選:C

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