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酶的固定技術叫什麼

發布時間:2023-05-15 03:35:09

『壹』 酶的固定化方法有哪些

一、包埋法
定義:將酶、細胞或原生質體包埋在各種多孔載體中,使其固定化的方法。
分類:根據載體的材料和方法的不同分為凝膠包埋法(網格型包埋法)、半透膜包埋法(微囊型包埋法)。
1、凝膠包埋法:應用最廣泛的固定化方法。
定義:以各種多孔凝膠為載體,將酶、細胞或原生質體包埋在凝膠的微孔內的固定化方法。
載體:瓊脂凝膠、海藻酸鈣凝膠、角叉菜膠、明膠、聚丙烯醯胺凝膠等。
注意事項:凝膠的孔徑應控制在小於酶分子直徑的范圍內;不適於那些底物或產物分子很大的酶類的固定化。
2、半透膜包埋法
定義:將酶或細胞包埋在由各種高分子聚合物製成的小球內,製成固定化酶或固定化細胞。
載體:聚醯胺膜、火棉膠膜等。 適用:底物和產物都是小分子物質的酶的固定化。
方法:將酶液滴分散在與水互不相溶的有機溶劑中,在酶液滴表面形成半透膜,將酶包埋在微膠囊中。

二、結合法
定義:選擇適宜的載體,使之通過共價鍵或離子鍵與酶結合在一起的固定化方法。
分類:根據酶與載體結合的化學鍵不同分為離子鍵結合法、共價鍵結合法。
1、離子鍵結合法
定義:通過離子鍵使酶與載體結合的固定化方法。
載體:某些不溶於水的離子交換劑,如DEAE-纖維素、DEAE-葡聚糖凝膠。
方法:一定條件下,酶與載體混合攪拌幾小時,或是將酶液緩緩流過處理好的離子交換柱。
特點:結合力較弱,在pH、離子強度等條件改變時,酶容易脫落。
使用注意:pH、離子強度、溫度等的控制。
2、共價鍵結合法
定義:通過共價鍵將酶與載體結合的固定化方法。
常用載體:纖維素、葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠等
可以形成共價鍵的基團:氨基、羧基、巰基、羥基、酚基和咪唑基等。
特點:結合牢固、酶不會脫落、可連續使用較長時間;載體活化的操作復雜;共價結合可能影響酶的空間結構,從而影響酶的催化活性。

『貳』 固定化酶一般採用什麼方法

固定化酶(immobilized enzyme),酶本身還是溶於水的,只是是用物理的或化學的方法使酶與水不溶性大分子載體結合或把酶包埋在其中,使得酶在水中溶性凝膠或半透膜的微囊體從而導致流動性降低.酶固定化後一般穩定性增加,易從反應系統中分離,且易於控制,能反復多次使用.便於運輸和貯存,有利於自動化生產,但是活性降低,使用范圍減小,技術還有發展空間.固定化酶是近十餘年發展起來的酶應用技術,在工業生產、化學分析和醫葯等方面有誘人的應用前景.
具體方法
吸附法
利用各種吸附劑將酶或含酶菌體吸附在其表面上而使酶固定的方法.通常有物理吸附法和離子吸附法.
常用吸附劑有活性炭、氧化鋁、硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃等.
採用吸附法固定酶,其操作簡便、條件溫和,不會引起酶變性或失活,且載體廉價易得,可反復使用.
載體結合法
最常用的是共價結合法,即酶蛋白的非必需基團通過共價鍵和載體形成不可逆的連接.在溫和的條件下能偶聯的蛋白質基團包括:氨基、羧基、半胱氨酸的巰基、組氨酸的咪唑基、酪氨酸的酚基、絲氨酸和蘇氨酸的羥基.參加和載體共價結合的基團,不能是酶表現活力所必需的基團.以中國首先採用的雙功能團試劑「對位-β-硫酸酯乙碸基苯胺」偶聯載體和酶為例,載體結合的步驟如下頁反應式.
此法曾先後用於3′-核糖核酸酶、5′-磷酸二酯酶和葡萄糖澱粉酶等的固定化.此外酶通過物理吸附或離子吸附於載體制備固定化酶也是常用的方法.
交聯法
依靠雙功能團試劑使酶分子之間發生交聯凝集成網狀結構,使之不溶於水從而形成固定化酶.常採用的雙功能團試劑有戊二醛、順丁烯二酸酐等.酶蛋白的游離氨基、酚基、咪唑基及巰基均可參與交聯反應.
包埋法
酶被裹在凝膠的細格子中或被半透性的聚合物膜包圍而成為格子型和微膠囊型兩種.包埋法制備固定化酶除包埋水溶性酶外還常包埋細胞,製成固定化細胞,例如可用明膠及戊二醛包埋具有青黴素醯化酶活力的菌體,可連續水解帤基青黴素,工業生產6-氨基青黴烷酸.
酶經過固定化後,比較能耐受溫度及pH的變化,最適pH往往稍有移位,對底物專一性沒有任何改變,實際使用效率提高幾十倍(如5′-磷酸二酯酶的工業應用)甚至幾百倍(如青黴素醯化酶的工業應用).

『叄』 什麼是固定化酶有何優點

所謂固定化酶,是指在一定的空間范圍內起催化作用,並能反復和連續使用的酶。通常酶催化反應都是在水溶液中進行的,而固定化酶是將水溶性酶用物理或化學方法處理,使之成為不溶於水的,但仍具有酶活性的狀態。

酶固定化後一般穩定性增加,易從反應系統中分離,且易於控制,能反復多次使用。便於運輸和貯存,有利於自動化生產,但是活性降低,使用范圍減小,技術還有發展空間。固定化酶是近十餘年發展起來的酶應用技術,在工業生產、化學分析和醫葯等方面有誘人的應用前景。

(3)酶的固定技術叫什麼擴展閱讀:

固定化酶的制備方法有物理法和化學法兩大類。

物理方法包括物理吸附法、包埋法等。物理法固定酶的優點在於酶不參加化學反應,整體結構保持不變,酶的催化活性得到很好保留。但是,由於包埋物或半透膜具有一定的空間或立體阻礙作用,因此對一些反應不適用。

化學法包括結合法、交聯法。結合法又分為離子結合法和共價結合法。是將酶通過化學鍵連接到天然的或合成的高分子載體上,使用偶聯劑通過酶表面的基團將酶交聯起來,而形成相對分子量更大、不溶性的固定化酶的方法。

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