㈠ 原位雜交技術的原位雜交技術分類
原位PCR技術是常規的原位雜交技術與PCR技術的有機結合,即通過PCR技術對靶核酸序列在染色體上或組織細胞內進行原位擴增使其拷貝數增加,然後通過原位雜交技術進行檢測,從而對靶核酸序列進行定性、定位和定量分析。原位PCR技術大大提高了原位雜交技術的靈敏度和專一性,可用於低拷貝甚至單拷貝的基因定位,為原位雜交技術的發展提供了更廣闊的發展前景。
原位雜交技術因其高度的靈敏性和准確性而日益受到許多科研工作者的歡迎,並廣泛應用到基因定位、性別鑒定和基因圖譜的構建等研究領域。目前原位雜交技術在植物中的應用比較廣泛,例如在棉花、麥類和樹木等的遺傳育種方面取得了顯著的成就,在畜牧上原位雜交技術主要用於基因定位和基因圖譜的構建以及轉基因的檢測和性別鑒定等方面。在水產方面,原位雜交技術則主要應用於基因定位(多見於對魚類和貝類等水生物的研究)和病毒的檢測(多見於蝦類)。此外,原位雜交技術做為染色體高分辨顯帶技術的補充和發展,在水生物的細胞遺傳學的研究領域將發揮更重要的作用。同其他的生物技術一樣,原位雜交技術在其發展與應用的過程中會出現一些問題,但隨著原位雜交技術的不斷改進與完善以及檢測手段的改進,原位雜交技術的優越性越來越突出,其應用也會更加廣泛。
㈡ 原位雜交檢測是查癌症的早晚期嗎
不是,是查那個基因突變引起的癌症,原位雜交技術是查特定的基因序列的
㈢ 熒光原位雜交技術的實驗結果怎麼分析
這個其實只要你根據你做實驗時犯得一些錯誤,然後你寫的時候就說應該注意哪些才能得到這樣正確的結果,怎樣避免其他錯誤結果
㈣ 原位雜交的原理是什麼有何用途
原位雜交的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的鹼基序列,將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件:組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物(曾呈奎等2000) 。
RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內RNA表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中鹼基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體 (Hybrids)經顯色反應後在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術 經不斷改進,其應用的領域已遠超出DNA原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已 成為最有效的分子病理學技術,同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。
㈤ 原位雜交技術的原位雜交的基本原理
原位雜交技術的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的鹼基序列,將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件:組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物(曾呈奎等2000) 。
RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內RNA表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中鹼基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體 (Hybrids)經顯色反應後在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術 經不斷改進,其應用的領域已遠超出DNA原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已 成為最有效的分子病理學技術,同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。
㈥ 熒光原位雜交技術的簡介
1969年,Gall和Pare等首次將同位素探針用於原位雜交實驗,獲得成功。1987年,染色體原位抑制雜交法的創建,使FISH技術得以迅速發展。隨後,Cremer等用生物素和汞或氨基乙醯熒光素等非放射性物質標記探針,創立了雙色FISH技術。1990年,Nederlof等用3種熒光素成功探測出了3種以上的靶位DNA序列,從而宣告了多色FISH技術的問世。FISH技術是一種非放射性分子遺傳學實驗技術,其基本原理是將直接與熒光素結合的寡聚核苷酸探針或採用間接法用生物素、地高辛等標記的寡聚核苷酸探針與變性後的染色體、細胞或組織中的核酸按照鹼基互補配對原則進行雜交,經變性—退火—復性—洗滌後即可形成靶DNA 與核酸探針的雜交體,直接檢測或通過免疫熒光系統檢測,最後在熒光顯微鏡下顯影,即可對待測DNA進行定性、定量或相對定位分析。FISH技術有以下幾點優勢:
① 安全、快速、靈敏度高;
② 探針能較長時間保存;
③ 多色標記,簡單直觀;
④ 可用於中期染色體及間期細胞的分析;
⑤ 可應用於新鮮、冷凍或石蠟包埋標本以及穿刺物和脫落細胞等多種物質的檢測。
㈦ 熒光原位雜交技術(FISH)和RT-PCR技術的比較,在檢測血液病融合基因有何不同
那隻能用rt-pct吧 血細胞沒法貼壁培養做不了fish
㈧ 組織細胞熒光原位雜交檢查消化三項結果顯示對蛋白活性有影響是什麼意思啊
熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪制方法,使用熒光素標記探針,以檢測探針和分裂中期的染色體或分裂間期的染色質的雜交。
意見建議:技術不但可用於已知基因或序列的染色體定位,而且也可用於未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。