什麼是pcr技術

㈠ 什麼是PCR擴增技術

基因擴增技術（PCR）聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction簡稱PCR）又稱無細胞分子克隆系統或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增法，是基因擴增技術的一次重大革新。可將極微量的靶DNA特異地擴增上百萬倍，從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力，能檢測單分子DNA或對每10萬個細胞中僅含1個靶DNA分子的樣品，因而此方法立即在分子生物學、微生物學、醫學及遺傳學等多領域廣泛應用和迅速發展。由於PCR具有敏感性高、特異性強、快速、簡便等優點，已在病原微生物學領域中顯示出巨大的應用價值和廣闊的發展前景。PCR擴增DNA的原理是：先將含有所需擴增分析序列的靶DNA雙鏈經熱變性處理解開為兩個寡聚核苷酸單鏈，然後加入一對根據已知DNA序列由人工合成的與所擴增的DNA兩端鄰近序列互補的寡聚核苷酸片段作為引物，即左右引物。此引物范圍就在包括所欲擴增的DNA片段，一般需20-30個鹼基對，過少則難保持與DNA單鏈的結合。引物與互補DNA結合後，以靶DNA單鏈為模板，經反鏈雜交復性（退火），在Taq DNA聚合酶的作用下以4種三磷酸脫氧核苷（dNTP）為原料按5'到3'方向將引物延伸、自動合成新的DNA鏈、使DNA重新復製成雙鏈。然後又開始第二次循環擴增。引物在反應中不僅起引導作用，而且起著特異性的限制擴增DNA片段范圍大小的作用。新合成的DNA鏈含有引物的互補序列，並又可作為下一輪聚合反應的模板。如此重復上述DNA模板加熱變性雙鏈解開—引物退火復性—在DNA聚合酶作用下的引物延伸的循環過程，使每次循環延伸的模板又增加1倍，亦即擴增DNA產物增加1倍，經反復循環，使靶DNA片段指數性擴增。

㈡ PCR技術的概念是什麼【在線等！！！！！！】

PCR診斷技術又叫多聚酶鏈式反應技術，它採用分子技術模擬核酸在體內的復制，從而判定疾病病原的種類，所以從本質上來說，這是一種實驗室診斷方法。

㈢ 什麼是PCR技術

PCR技術是模擬體內DNA的天然復制過程，在體外擴增DNA分子的一種分子生物學技術，主要用於擴增位於兩段已知序列之間的DNA區段。在待擴增的DNA片段兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物，經變性、退火和延伸若干個循環後，DNA擴增2ⁿ倍。

PCR的每個循環過程包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三個不同的事件：（①變性：加熱使模板DNA在高溫下（94℃左右）雙鏈間的氫鍵斷裂而形成兩條單鏈；②退火；使溶液溫度降至50~60℃，模板DNA與引物按鹼基配對原則互補結合。

3、延伸：溶液反應溫度升至72℃，耐熱DNA聚合酶以單鏈DNA為模板，在引物的引導下，利用反應混合物中的4種脫氧核苷三磷酸（dNTP），按5'一3』方向復制出互補DNA。

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【技術原理】

DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據鹼基互補配對原則復製成同樣的兩分子拷貝。在實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低後又可以復性成為雙鏈。

因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，並設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。

但是，DNA聚合酶在高溫時會失活，因此，每次循環都得加入新的DNA聚合酶，不僅操作煩瑣，而且價格昂貴，制約了PCR技術的應用和發展。

發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對於PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，並逐步應用於臨床。

【工作原理】

類似於DNA的天然復制過程，其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火（復性）--延伸三個基本反應步驟構成：

①模板DNA的變性：模板DNA經加熱至90~95℃一定時間後，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備。

②模板DNA與引物的退火（復性）：模板DNA經加熱變性成單鏈後，溫度降至50~60℃，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合。

③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在DNA聚合酶的作用下，於70~75℃，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按鹼基配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈重復循環變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的「半保留復制鏈」。

而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2～4分鍾，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

【工作步驟】

標準的PCR過程分為三步：

1.DNA變性（90℃-96℃）：雙鏈DNA模板在熱作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈DNA

2.退火（復性）（40℃-65℃）：系統溫度降低，引物與DNA模板結合，形成局部雙鏈。

3.延伸（68℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右最佳的活性）的作用下，以dNTP為原料，從引物的5′端→3′ 端延伸，合成與模板互補的DNA鏈。

每一循環經過變性、退火和延伸，DNA含量既增加一倍。

現在有些PCR因為擴增區很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的時間內復制完成，因此可以改為兩步法，即退火和延伸同時在60℃-65℃間進行，以減少一次升降溫過程，提高了反應速度。

㈣ pcr技術的四種原料是什麼

pcr技術的四種原料是dNTP、引物、模板DNA、Taq DNA聚合酶。

引物有多種設計方法，由PCR在實驗中的目的決定，但基本原則相同。PCR所用的酶主要有兩種來源：Taq和Pfu，分別來自兩種不同的噬熱菌。其中Taq擴增效率高但易發生錯配。Pfu擴增效率弱但有糾錯功能。所以實際使用時根據需要必須做不同的選擇。

模板即擴增用的DNA，可以是任何來源，但有兩個原則，第一純度必須較高，第二濃度不能太高以免抑制。

緩沖液的成分最為復雜，除水外一般包括四個有效成分：緩沖體系，一般使用HEPES或MOPS緩沖體系；一價陽離子，一般採用鉀離子，但在特殊情況下也可使用銨根離子。

二價陽離子，即鎂離子，根據反應體系確定，除特殊情況外不需調整；輔助成分，常見的有DMSO、甘油等，主要用來保持酶的活性和幫助DNA解除纏繞結構。

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標準的PCR過程分為三步：

1、DNA變性：（90℃-96℃）：雙鏈DNA模板在熱作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈DNA

2、退火：（60℃-65℃）：系統溫度降低，引物與DNA模板結合，形成局部雙鏈。

3、延伸：（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP為原料，從引物的3′端開始以從5′→3′端的方向延伸，合成與模板互補的DNA鏈。

每一循環經過變性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍。如圖所示：現在有些PCR因為擴增區很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的時間內復制完成，因此可以改為兩步法，即退火和延伸同時在60℃-65℃間進行，以減少一次升降溫過程，提高了反應速度。

㈤ 什麼叫PCR技術

PCR技術也就是基因擴增技術，它是通過基因擴增儀，在細胞外進行DNA復制，由1個DNA分子增加到2個，然後依次增加到4個，8個…，使分子數目呈幾何級數增加，以在短時間內獲得足夠的DNA，供研究用的一種技術。

PCR技術的出現，使生物學的研究一大突破。在PCR技術問世之前，人們無法查出愛滋病病毒感染者，因為這種病毒在感染者體內的含量很少，且難於培養。在PCR技術問世之後，可將愛滋病病毒的核酸進行擴增從而查出受感染者，並可研究治療方法。

PCR技術，還可對運動場上男扮女裝的「女運動員」加以識別。過程如下：從自報是女運動員頭上取1根帶毛囊的頭發，加蒸餾水煮沸，，使毛囊細胞破裂；把高速離心分離出的染色體放入其因擴增儀中進行基因擴增；大約2小時後，用一定的染料對擴增液染色；最後，把經染色的擴增液體塗在瓊脂板上，用紫外線照射，如果出現橘紅色光帶，則說明染色體中含有睾丸決定基因（在Y染色體上），為男性，否則為女性。

目前，這項技術是性別鑒定中的最佳技術，准確性可達100%，也是迄今為止最文明的性別檢測法之一，只要1根毛發即可辨男女。

1992年，在巴塞羅那奧運會上，組委會決定首先使用基因擴增法識別性別，但由於准備不足，只局限用於最可疑的少數運動員。1993年，在我國上海舉行的首屆東亞運動會上，全面使用了這一技術。在這屆運動會前夕，有關科研人員進行了1037例「預試」，還進行了10例「雙盲」（驗方和遞方都不知道頭發是取自男還是女）試驗，結果表明，准確率達100%！這種既文明又准確的性別鑒定法，解除了「性別舞弊」對運動會官員的困擾。

PCR技術已經在分子生物學中發揮了重要作用。可以預知，它在遺傳病診斷、治療，在動、植物育種，以及在司法破案等方面，將會發揮更大的作用。

㈥ 什麼是PCR

PCR是聚合酶鏈式（Polymerase Chain Reaction）反應的簡稱，是一種將幾個或幾十個拷貝數DNA片段擴增至上百萬份拷貝的方法，這是迄今為止最為重要的技術之一。PCR技術的影響不僅僅局限於生物科學領域，幾乎人人都可以感受到PCR所帶來的改變，在親子鑒定以及犯罪調查中PCR技術便有廣泛應用。

㈦ 什麼是PCR

聚合酶鏈式反應簡稱PCR（英文全稱：Polymerase Chain Reaction）， 聚合酶鏈式反應
具體內容點擊： 聚合酶鏈式反應，簡稱PCR。聚合酶鏈式反應，其英文Polymease Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個周期,循環進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。它不僅可用於基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究,還可用於疾病病的診斷或任何有DNA,RNA的地方．聚合酶鏈式反應（Polymerase Chain Reaction，簡稱PCR）又稱無細胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增技術。 由美國科學家PE（Perkin Elmer珀金-埃爾默）公司遺傳部的Dr. Mullis發明，由於PCRPCR技術在理論和應用上的跨時代意義，因此Mullis獲得了1993年諾貝爾化學獎。

㈧ 什麼是PCR技術有何特點

PCR診斷技術又叫多聚酶鏈式反應技術,它採用分子技術模擬核酸在體內的復制,從而判定疾病病原的種類. PCR技術不需要觀察動物的外觀表現,所以無論是在潛伏期還是爆發期,只要對動物的相應器官進行檢測,在兩個小時內就能准確判定出畜禽疾病的原因和種類,這就意味著能夠...什麼是豬流感? 豬流感是由豬流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病,這種病在豬中經常發生,但很少導致豬的死亡。...反轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR):由於PCR技術具有簡便、快速、靈敏、特異性強等特點,已用於豬流感病毒基因的檢測和分子流行病學...甲型HIN1流感知識解答 什麼是甲型HIN1流感 甲型HIN1流感是一種具有高度傳染性的豬的急性呼吸道疾病,由幾種豬A型流感病毒其中的...反轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR):由於PCR技術具有簡便、快速、靈敏、特異性強等特點,已用於甲型HIN1流感病毒基因的檢測和分子...反轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR):由於PCR技術具有簡便、快速、靈敏、特異性強等特點,已用於豬流感病毒基因的檢測和分子流行病學...陳竺表示,這次豬流感疫情有一些特點,包括是由新的豬流感病毒變異株引起,人群普遍易感,已引起跨國、跨洲傳播;出現了人傳人病例;...

㈨ 什麼是pcr技術典型的pcr技術分為幾個步驟

Pcr技術是指DNA的體外擴增技術，也叫DNA多聚酶鏈式反應，該技術分為變性、復性和子鏈延伸三個步驟，變性是高溫下DNA解開雙鏈，復性是DNA模板鏈與引物配時，子鏈延伸是按鹼基互補配對原則合成子鏈。