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pcr技術中拷貝時要多少引物

發布時間:2022-12-16 01:04:42

Ⅰ PCR復制n次,至少需要加入多少引物

每一條子鏈的合成都需要一個
引物
。PCR復制n次,產生DNA的個數2^n,每個DNA兩條鏈,共2^n*2=2^(n+1),再減去兩條
母鏈
,所以至少需要加入引物個數2的n+1次方減2

Ⅱ PCR復制n次,至少需要加入多少引物

每一條子鏈的合成都需要一個引物。PCR復制n次,產生DNA的個數2^n,每個DNA兩條鏈,共2^n*2=2^(n+1),再減去兩條母鏈,所以至少需要加入引物個數2的n+1次方減2

Ⅲ pcr需要幾個引物

普通PCR需要正反向引物各一條,即一對引物,有些特殊PCR需要多條引物。

Ⅳ 生物選修三中PCR技術,將一個DNA分子復制8次,至少需要幾對引物 要解答

需要兩對不會引起鹼基互補配對原的引物。。。這和復制次數沒有關系。

Ⅳ 利用PCR技術復制那麼多DNA一共需要多少引物每復制一次都需要一段引物嗎

你理解的不錯,每次復制都需要消耗一對引物。不過原理還是要好好學哦。
首先引物是論「對」就是兩條(rapd等特殊pcr用單條,lamp用6條……算了,那個不是pcr),這n對引物是完全一樣的。不要說「段」,說段會被誤會成不一樣的序列的~因此你這個題目也可以答成「一個完整的pcr中,n次復制擴增都是同一段引物引導的」。
引物雖然分子的數量很大,但是,那是分子啊~~~反應前加試劑只加幾微升就好了。放心~

Ⅵ PCR技術和DNA復制需要引物嗎如果需要,分別是什麼

你做PCR是需要引物的,引物的用量、條數和種類根據你實驗的目的而定,例如普通的擴增有上下游兩條引物即可,有的多重PCR檢測需要多對引物同時工作,有的PCR需要引物上引入酶切位點,有的PCR要求引物具有一定的隨機性等等。

而DNA復制我不是太明白意思。是指從基因組上復制一段序列下來嗎?還是指生物體內DNA分子復制過程?

如果你只是想利用PCR技術復制一段DNA片段的話,找出序列信息,利用DNAstar,primer premier等軟體設計一對合適的引物,交給例如華大基因、上海生工等公司去合成就,引物拿到後用基因組DNA做模板,跑個PCR就可以了。

而如果你問的是在生物體內的DNA復制,那是需要RNA引物的。體內的雙螺旋在DNA解旋酶的作用下打開後,形成兩條單鏈。DNA聚合酶以此兩條單鏈為模板,在每條單鏈的5『端合成一小段RNA片段作為引物,接著往下復制。解旋酶揭開多少,就復制多少,每解開一段,就在這一段的開頭加一個RNA引物。在此過程中就會看到RNA引物-DNA-RNA引物-DNA這樣的重復,每一個重復就叫做一個岡崎片段。

原理如樓上所說。

Ⅶ PCR引物濃度一般選多少

PCR引物濃度一般選5~20μmol/L。

PCR反應五要素:參加PCR反應的物質主要有五種即:引物(PCR引物為DNA片段,細胞內DNA復制的引物為一段RNA鏈)、酶、dNTP、模板和緩沖液(其中需要Mg2+)。

引物有多種設計方法,由PCR在實驗中的目的決定,但基本原則相同。PCR所用的酶主要有兩種來源:Taq和Pfu,分別來自兩種不同的噬熱菌。其中Taq擴增效率高但易發生錯配。Pfu擴增效率弱但有糾錯功能。所以實際使用時根據需要必須做不同的選擇。

模板即擴增用的DNA,可以是任何來源,但有兩個原則,第一純度必須較高,第二濃度不能太高以免抑制。

緩沖液的成分最為復雜,除水外一般包括四個有效成分:緩沖體系,一般使用HEPES或MOPS緩沖體系;一價陽離子,一般採用鉀離子,但在特殊情況下也可使用銨根離子;二價陽離子,即鎂離子。

(7)pcr技術中拷貝時要多少引物擴展閱讀

PCR技術的基本原理類似於DNA的天然復制過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性-退火-延伸三個基本反應步驟構成:

①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時間後,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;

②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈後,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;

③引物的延伸:DNA模板-引物結合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按鹼基互補配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈,重復循環變性-退火-延伸三過程就可獲得更多的「半保留復制鏈」。

而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2~4分鍾,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

Ⅷ 用pcr技術復制了n次需要多少個引物

用pcr技術復制了n次需要多少個引物:
10uM濃度的引物,加個1ul足矣
可根據你自身實驗情況調節

Ⅸ 利用PCR技術復制那麼多DNA一共需要多少引物每復制一次都需要一段引物嗎

你理解的不錯,每次復制都需要消耗一對引物.不過原理還是要好好學哦.首先引物是論「對」就是兩條(rapd等特殊pcr用單條,lamp用6條……算了,那個不是pcr),這n對引物是完全一樣的.不要說「段」,說段會被誤會成不一樣的...

Ⅹ 1個DNA分子進行PCR擴增,循環4次,理論上至少需要幾個引物

如果是雙鏈,第一次循環要1對引物,第二次要2對,第三次4對,第四次要8對.總共15對.上下游引物各15條.
如果是單鏈,第一次循環要1條引物,第二次要1對,第三次2對,第四次要4對.總共7對半.上下游分別8和7條.
不過這都是理論,實際上引物要多得多才能P出來!

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