酶聯耦合技術是什麼

㈠ 什麼是耦合 如何解釋

耦合是指兩個或兩個以上的電路元件或電網路等的輸入與輸出之間存在緊密配合與相互影響，並通過相互作用從一側向另一側傳輸能量的現象。

現實工程中，物理場是許多的，溫度場，引力場，濕度場等等均屬於物理場，而要解決的許多問題是這些物理場的疊加問題，因為這些物理場之間是相互影響的。

比如煉鋼的時候溫度高低對於應力分布就有影響。這種多個物理場相互疊加的問題就叫做多場耦合問題，也是一種耦合。

(1)酶聯耦合技術是什麼擴展閱讀

耦合按從強到弱的順序可分為以下幾種類型：

（1）內容耦合。當一個模塊直接修改或操作另一個模塊的數據,或者直接轉入另一個模塊時，就發生了內容耦合。此時，被修改的模塊完全依賴於修改它的模塊。

（2）公共耦合。兩個以上的模塊共同引用一個全局數據項就稱為公共耦合。

（3）外部耦合。若一組模塊都訪問同一全局數據項，則稱為外部耦合。

（4）控制耦合。一個模塊在界面上傳遞一個信號（如開關值、標志量等）控制另一個模塊，接收信號的模塊的動作根據信號值進行調整，稱為控制耦合。

（5）標記耦合。模塊間通過參數傳遞復雜的內部數據結構，稱為標記耦合。此數據結構的變化將使相關的模塊發生變化。

㈡ 酶聯免疫系統介紹

酶聯免疫是指酶標記免疫檢測技術（ELISA）。屬於標記免疫學技術的一種，1971年由荷蘭和瑞典的學者提出，由於其操作過程簡單易行並可以定量，從而使其在食品安全和衛生檢測中得到了廣泛的應用。目前市場上有多種基於ELISA方法開發的用於食品中抗生素檢測的試劑盒產品.

基於抗原抗體反應的特異性和等比例性，以96孔的聚苯乙烯塑料微孔板（又稱酶標板）為載體，在適當的技術條件下使抗原或抗體包被（吸附）在酶標板微孔的內壁上成為所謂的包被（固相）抗體或抗原，沒有被吸附（游離）的抗原或抗體通過洗滌除去，然後直接加入酶標記抗體或抗原（或先加入適當的抗體或抗原與包被抗原或抗體反應後，再加入相應的酶標記抗體或抗原），形成酶標記的抗原—抗體復合物固定在微孔內，沒有吸附的酶標記物洗滌去除，加入底物溶液於微孔中，復合物上的酶催化底物使其水解、氧化或還原成為有色的底物。在一定的條件下，復合物上酶的量（也反映了固定化的抗原抗體復合物的量）和酶產物呈現的色澤成正比，因此可以用分光光度計進行測定，從而計算出參與反應的抗原和抗體的量。這就是ELISA的原理。

ELISA可以分為直接法、間接法和夾心法等幾種。

直接法：

直接法是指酶標抗原或抗體直接與包被在酶標板上的抗體或抗原結合形成酶標抗原—抗體復合物，加入酶反應底物，測定產物的吸光值，計算出包被在酶標上的抗體或抗原的量。見圖2-17（a）

間接法：

是將酶標記在二抗上，當抗體（一抗）和包被在酶標板的抗原結合形成復合後，再以酶標二抗和復合物結合，通過測定酶反應產物的顏色可以（間接）反應一抗和抗原的結合情況，進而計算出抗原或抗體的量。見圖2-17（b）

夾心法：

是先將未標記的抗體包被在酶標板上，用於捕獲抗原，在用酶標的抗體與抗原反應形成抗體-抗原-酶標抗體復合物；也可以象間接法一樣應用酶標二抗和抗體-抗原-抗體復合物結合，形成抗體-抗原-抗體-酶標二抗復合物，見圖2-17（C）。前者稱為直接夾心法，後者稱為間接夾心法。

㈢ 酶聯法是什麼

酶聯免疫法，簡稱ELISA。它的中心就是讓抗體與酶復合物結合，然後通過顯色來檢測。步驟其實很簡單：ELISA用血清來檢測，首先血液要經過至少半個小時的凝集，然後取血清（這是有些網友不理解為什麼醫院抽完了血對血置之不理的原因，其實是誤會）。將酶復合物用稀釋液稀釋後，加血清及陰性、陽性對照，還有就是質控品（這是嚴格的要求，它的范圍必須在質控范圍內）。經過一個小時的孵育，然後洗板，加底物，半個小時避光反應後加終止液即完成反應部分，然後就是讀數。由數值來判斷結果的陰性或陽性。嚴格的講，如果第一次檢測為陽性的話，無論是哪個實驗室，必須按照CDC的HIV操作規程來進行第二次檢測，第二次的方法必須與第一次的不同，如還是陽性，將送確認實驗室確認。有的醫院很不負責，將初篩陽性的報告發出後就不管了，這是不對的。必須經過確認實驗室確認後才可出陽性診斷。祝大家。PS，第一次檢測為陽性的話，一定要去確認實驗室再做一次，勇敢的去面對，也許結果就不一樣了。

㈣ 簡述酶聯免疫吸附實驗有哪些技術類型。

（一）雙抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法，操作步驟如下：（1）將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結合的抗體及雜質。（2）加受檢標本：使之與固相抗體接觸反應一段時間，讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合，形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。（3）加酶標抗體：使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。（4）加底物：夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。根據同樣原理，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物，即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。（二）雙位點一步法在雙抗體夾心法測定抗原時，如應用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體，則在測定時可使標本的加入和酶標抗體的加入兩步並作一步（圖15-5）。這種雙位點一步不但簡化了操作，縮短了反應時間，如應用高親和力的單克隆抗體，測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應用使測定抗原的ELISA提高到新水平。在一步法測定中，應注意鉤狀效應（hookeffect），類同於沉澱反應中抗原過剩的後帶現象。當標本中待測抗原濃度相當高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成夾心復合物，所得結果將低於實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現假陰性結果。（三）間接法測抗體間接法是檢測抗體最常用的方法，其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：（1）將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結合的抗原及雜質。（2）加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經洗滌後，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質由於不能與固相抗原結合，在洗滌過程中被洗去。（3）加酶標抗抗體：與固相復合物中的抗體結合，從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌後，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體，可用酶標羊抗人IgG抗體。（4）加底物顯色：顏色深度代表標本中受檢抗體的量。本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。 （四）競爭法競爭法可用於測定抗原，也可用於測定抗體。以測定抗原為例，受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合，因此結合於固相的酶標抗原量與受檢抗原的量呈反比。操作步驟如下：（1）將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體。洗滌。（2）待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原，則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原，則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合，競爭性地佔去了酶標抗原與固相載體結合的機會，使酶標抗原與固相載體的結合量減少。參考管中只加酶標抗原，保溫後，酶標抗原與固相抗體的結合可達最充分的量。洗滌。 （3）加底物顯色：參考管中由於結合的酶標抗原最多，故顏色最深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差，代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡，表示標本中抗原含量越多。（五）捕獲法測IgM抗體血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在，後者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗本多用捕獲法，先將所有血清IgM（包括異性IgM和非特異性IgM）固定在固相上，在去除IgG後再測定特異性IgM。操作步驟如下：（1）將抗人IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗人IgM。洗滌。（2）加入稀釋的血清標本：保溫反應後血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質成分。（3）加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結合。洗滌。（4）加入針對特異性的酶標抗體：使之與結合在固相上的抗原反應結合。洗滌。（5）加底物顯色：如有顏色顯示，則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在，是為陽性反應。（六）應用親和素和生物素的ELISA親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每個分子由4個亞基組成，可以和4個生物素分子親密結合。現在使用更多的是從鏈黴菌中提取的鏈霉和素（strepavidin）。生物素（biotin）又稱維生素H，分子量244.31，存在於蛋黃中。用化學方法製成的衍生物，生物素－羥基琥珀亞胺酯（biotin-hydroxysuccinimide，BNHS）可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產物。親和素與生物素的結合，雖不屬免疫反應，但特異性強，親和力大，兩者一經結合就極為穩定。由於1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置，可以連接更多的生物素化的分子，形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物素與ELIS偶聯起來，就可大提高ELISA的敏感度。親和素－生物素系統在ELISA中的應用有多種形式，可用於間接包被，亦可用於終反應放大。可以在固相上先預包被親和素，原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結合，通過親和素－生物素反應而使生物素化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量，而且使其結合點充分暴露。另外，在常規ELISA中的酶標抗體也可用生物素化的抗體替代，然後連接親和素－酶結合物，以放大反應信號。

㈤ 什麼是耦合技術

耦合是指兩個實體相互依賴於對方的一個量度，耦合技術是一種能有效地隔離噪音和抑制干擾的技術，隨著數字通信技術的迅速發展，耦合技術發揮了重要作用。耦合作為名詞在通信工程、軟體工程、機械工程等工程中都有相關名詞術語。
主要分類分為以下幾種：
非直接耦合：兩個模塊之間沒有直接關系，它們之間的聯系完全是通過主模塊的控制和調用來實現的。
數據耦合：一個模塊訪問另一個模塊時，彼此之間是通過簡單數據參數 (不是控制參數、公共數據結構或外部變數) 來交換輸入、輸出信息的。
標記耦合：一組模塊通過參數表傳遞記錄信息，就是標記耦合。這個記錄是某一數據結構的子結構，而不是簡單變數。其實傳遞的是這個數據結構的地址；
控制耦合：如果一個模塊通過傳送開關、標志、名字等控制信息，明顯地控制選擇另一模塊的功能，就是控制耦合。
外部耦合：一組模塊都訪問同一全局簡單變數而不是同一全局數據結構，而且不是通過參數表傳遞該全局變數的信息，則稱之為外部耦合。
公共耦合：若一組模塊都訪問同一個公共數據環境，則它們之間的耦合就稱為公共耦合。公共的數據環境可以是全局數據結構、共享的通信區、內存的公共覆蓋區等。
內容耦合：如果發生下列情形，兩個模塊之間就發生了內容耦合
(1) 一個模塊直接訪問另一個模塊的內部數據；
(2) 一個模塊不通過正常入口轉到另一模塊內部；
(3) 兩個模塊有一部分程序代碼重疊(只可能出現在匯編語言中)；
(4) 一個模塊有多個入口。
多場耦合：現實工程中，物理場是許多的，溫度場，應力場，濕度場等等均屬於物理場，而我們要解決的許多問題是這些物理場的疊加問題，因為這些物理場直接是相互影響的。比如煉鋼的時候溫度高低對於應力分布就有影響。
這種多個物理場相互疊加的問題就叫做多場耦合問題，也是一種耦合.

㈥ 酶聯法的介紹

酶聯法即酶聯免疫吸附試驗是檢測艾滋病的一種固相免疫測定技術，其先將抗體或抗原包被到某種固相載體表面，並保持其免疫活性。這種方法簡稱ELISA。酶聯免疫吸附試驗是一種固相免疫測定技術，其先將抗體或抗原包被到某種固相載體表面，並保持其免疫活性。

㈦ 酶聯反應的技術原理

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物後，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由於酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。

㈧ 什麼是酶聯免疫法

酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法，即酶聯免疫吸附測定法。基本原理是使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，並保持其免疫活性。
酶聯免疫法別稱
ELISA，ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應，用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。
再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例，加入酶反應的底物後，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
(8)酶聯耦合技術是什麼擴展閱讀；
用於臨床檢驗的酶聯免疫法檢驗；雙抗體夾心法測抗原法，在臨床檢驗中，此法適用於檢驗各種蛋白質等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體，就可用於包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。
如抗體的來源為抗血清，包被和酶標用的抗體最好分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用於包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應，作「一步法」檢測。
雙抗體夾心法適用於測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用於測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。
參考資料；搜狗網路--酶聯免疫法

㈨ 什麼是酶聯免疫法

酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法，即酶聯免疫吸附測定法。

1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法，即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。

ELISA現在已成為目前分析化學領域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術( immunoenzymatic techniques ) 的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術 。

酶標抗體標記效果測定：測定內容包括酶和抗體活性、結合物中酶含量和IgG含量、酶與IgG摩爾比值以及結合率。

(9)酶聯耦合技術是什麼擴展閱讀：

酶聯免疫法基本原理

①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，並保持其免疫活性。

②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本（測定其中的抗體或抗原）和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。

用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開，最後結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。

加入酶反應的底物後，底物被酶催化變為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據顏色反應的深淺來進行定性或定量分析。由於酶的催化頻率很高，故可極大地放大反應效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。

ELISA可用於測定抗原，也可用於測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：

①固相的抗原或抗體

②酶標記的抗原或抗體

③酶作用的底物（顯色劑）。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。

㈩ 什麼是酶聯免疫吸附法

酶聯免疫吸附法（enzyme：linked：immunosorbent：assay，ELISA）是把抗原—抗體的免疫反應與酶的催化反應相互結合而發展起來的一種綜合性技術，它的靈敏度高，特異性強，特別是當寄主體內病毒濃度很低或同時存在病毒鈍化物或抑制劑時，它的優勢尤為明顯，因而是近年來病毒檢測方法中發展最快、應用最廣的一種方法。

此方法的原理是利用以酶標記的特異抗體來指示抗原—抗體的結合，從而檢出樣品中的抗原。

具體操作程序是：將待檢植物汁液（抗原）注入酶聯板（聚苯乙烯多孔微量反應板）中，使抗原吸附於它的孔壁，然後加入以酶標記的特異抗體，待抗原與抗體充分反應後，洗去未與抗原結合的多餘酶標記抗體，於是在固相載體酶聯板表面就只留下以酶標記的抗原—抗體復合物。這時加入酶的無色底物，復合物上的酶催化底物降解，生成有色產物，其強度與病毒濃度呈正比。這一結果可用肉眼識別，也可用分光光度計對底物的降解量進行測定。