① 液相色譜儀的使用步驟
目的：制定規范的高效液相色譜儀操作、維護保養和清潔規程。
范圍：適用於Agilent 1260 HPLC。
責任：色譜檢驗工程師負責本規程執行。
內容：
1 開機
1.1 打開電腦。
1.2 打開液相色譜各個模塊的電源。
1.3 雙擊桌面「儀器—聯機」，進入聯機界面。
1.4 排氣：
1.4.1 手動旋開泵處沖洗閥（逆時針旋轉約1圈）。
1.4.2 右鍵單擊「泵」圖標區域，選擇「方法…」選項，進入泵編輯畫面，設流速：5ml/min（一般為3－5ml/min），點擊「確定」。
1.4.3 右鍵單擊「泵」 圖標，點擊「控制…」選項，選中「ON」，點擊「確定」，則系統開始沖洗，直到管線內（由溶劑瓶到泵入口）無氣泡為止，（一般為5分鍾），切換通道繼續沖洗，直到所有要用通道無氣泡為止。
1.4.4 右鍵單擊「泵」 圖標，點擊「方法…」選項，設流速：0ml/min，手動旋緊沖洗閥。
1.4.5 右鍵單擊「泵」圖標，點擊「方法…」選項，按照方法要求選擇合適比例的流動相，設流速：1.0ml/min。
1.4.6 同理右鍵單擊「柱溫箱」，「檢測器」圖標，點擊「方法…」選項，按照方法的要求設置溫度，波長，點擊「控制」 選項，「ON」打開柱溫箱和檢測器。
2 編輯方法
2.1 點擊「方法」－「編輯完整方法」開始編輯完整方法。
2.2 選中除「數據分析 」外的三項，進入下一選項卡。
2.3 方法信息：在「方法注釋」中加入方法的信息（如：This is for test!）。進入下一選項卡。
2.4 泵參數設定：在「流速」處輸入流量, 如1.0ml/min，停止時間：如10 min（該停止時間僅為做一個樣品需要的時間），按照要求選擇合適比例的流動相配比，如乙腈：水＝75：25，A為水，B為乙腈，則設置B：75％即可。進入下一選項卡。
2.5 自動進樣器參數設定: 選擇「洗針進樣」----可以輸入進樣體積和洗瓶位置，進入下一選項卡。
2.6 柱溫箱參數設定: 在「溫度」下面的空白方框內輸入所需溫度,如：40度。進入下一選項卡。
2.7 UV檢測器參數設定: 在「波長」下方的空白處輸入所需的檢測波長,如254nm。點擊確定。
2.8 在「 運行時選項表 」中，選中「 數據採集」，點擊「確定」。
2.9 從「方法」菜單，選中「方法另存為…」，輸入一方法名，如「測試」，點擊「確定。
3 單次採集
3.1 從「運行控制」菜單中，選擇「樣品信息」選項，選擇合適的路徑，在「數據文件」中選擇 「前綴/計數器」，輸入樣品瓶的位置，點擊「確定」。
3.2 基線平穩後約10分鍾，從「運行控制」菜單中選擇「運行方法」。
4 多次數據採集
4.1 按照步驟2 編輯完整方法。
4.2 點擊「序列」－「序列表」，輸入「樣品瓶」「樣品名稱」，「進樣次數」，選擇合適的「做樣方法」
4.3 點擊「序列」－「序列參數」，選擇序列數據的保存路徑（序列會自動生成以「序列名稱－時間」為名稱的文件夾保存數據），數據建議以選擇 「前綴/計數器」保存。
4.4 從「序列」菜單，選中「序列另存為…」，輸入一序列名，如「測試」，點擊「確定。
4.5 從「運行控制」菜單中選擇「運行序列」。
5 數據分析（離線狀態使用）
5.1 雙擊「儀器 —離線」圖標 進入的離線畫面。
5.2 從「視圖」菜單中，點擊「數據分析」進入數據分析畫面。
5.3 從「文件」菜單選擇「調用信號」，選中您的數據文件名。點擊「 確定」，則數據被調出。（如預建立標准曲線，應先打開濃度較低的標樣圖譜。）
5.4 做譜圖優化：從「圖形」菜單中選擇「信號選項」。從「范圍」 中選擇「滿量程」 或「自動量程」 及合適的時間范圍或選擇「自定義量程」 調整。反復進行，直到圖的比例合適為止。點擊「 確定」。
6 積分:
6.1 從「積分」菜單中選擇「積分事件」選項，選擇合適的「斜率靈敏度」，「峰寬」，「最小峰面積」，「最小峰高」。點擊 ，自動載入積分參數。
6.2 點擊左邊「√」圖標，將積分參數存入方法並退出「積分事件」。
6.3 如積分結果不理想，則修改相應的積分參數，直到滿意為止。
7 標准曲線
7.1 點擊「校正」－「校正設置」，輸入「含量單位」。
7.2 點擊「校正」－「新建校正表」，點擊確定。輸入「化合物名稱」和「含量」，點擊「確定」，按照提示刪除其他組分。
7.3 至此完成單級校正，如要增加校正級別，應從「文件」菜單選擇「調用信號」，選中您的數據文件名（第二個標樣），點擊「校正」－「添加級別」，點擊確定，輸入「含量」，依次增加校正級別。
8 列印報告
8.1 從「報告」菜單中選擇「設定報告」選項，點擊「定量結果」框中「定量」右側的黑三角，選中「外標法」，其它選項不變，點擊「 確定」。
8.2 從「報告」菜單中選擇「列印報告」，則報告結果將列印到屏幕上，如想輸出到列印機上，則點擊「報告」 底部的「列印」鈕。
8.3 點擊「文件」－「另存為」－「方法」，把數據分析方法保存，下次分析可直接在「文件」－「調用」－「方法」下，將該方法調出使用。（調用的方法中含有積分方法，標准曲線方法和列印報告方法）
9 關機
9.1 關機前，先關紫外燈，用相應的溶劑（甲醇或乙腈）充分沖洗系統大約30分鍾。（色譜柱最終應保存在甲醇或乙腈中）
9.2 退出化學工作站，依提示關泵，及其它窗口，關閉計算機。
9.3 關閉Agilent 1260各模塊電源開關。
10 其它注意事項
10.1 當樣品運行時，切勿打開自動進樣器前遮蓋，否則進樣過程停止。
10.2 系統發生漏液時，機器會檢測到並停止進樣，狀態指示燈為紅色。檢查擦乾並安置好漏液處，擦乾漏液感測器，單擊ON按鈕，系統重新初始化。
10.3 注意紫外燈使用壽命，切勿來回開關紫外燈。