1. 病原體的培養和分離
雖較直接檢查法為慢,且較為復雜,但更准確,應用范圍也更廣,幾乎可用於所有的病原體。一般除病毒、衣原體和立克次氏體外,都可用無生命的培養基培養和分離。培養基的種類很多,可根據不同的病原體加以選用。培養分離病原體後,還可進行各種試驗,如發酵試驗、毒力試驗等,這對病原體的進一步鑒定非常重要。病毒、衣原體和立克次氏體缺乏維持生命所必須的各種酶,不能像細菌那樣從培養基中攝取營養物質,利用自己的酶來合成自己所需的各種成分,不能用無生命的培養基培養,而必須接種到有生命的機體內,利用機體的酶來合成它們所需的各種成分。這種方法稱「病毒分離」、「衣原體分離」或「立克次氏體分離」。
分離的方法一般有三種:
①組織培養。最簡單常用;
②動物胚胎(如雞胚、鴨胚)接種;
③動物接種,如接種小白鼠、豚鼠等。不同的病毒、衣原體或立克次氏體常需要不同的分離方法,分離陽性後也常需進行各種試驗(如血清學試驗等)才能最後判定其種類。病原體的直接檢查常與病原體的培養分離同時進行。
除上述兩種方法外,還有一些特殊的檢查方法。例如對懷疑為的人或動物可取其腦組織檢查特異性包涵體(內格里氏小體)確診;檢查乙型肝炎表面抗原可用反向被動血凝法(RPHA)酶聯免疫吸附試驗(ELISA)及放射免疫試驗(RIA)等方法;檢查糞便中的甲型肝炎病毒可用免疫電鏡等。還可應用分子雜交或核酸分析的方法來檢驗病人血液、組織或排泄物中的病原體核酸以協助診斷,如血液中及肝組織中的乙型肝炎病毒核酸,就可用分子雜交的方法檢測;糞便中的輪狀病毒可用核酸分析的方法來檢測等。由於病原體的各種抗原和病原體的核酸都是病原體的特異性成分,因此如果它們出現陽性也就表示病原體陽性,故這些方法也具有很大的確定診斷的意義。
2. 流行病毒的分離培養與鑒定實驗的原理
RT-PCR。利用Vero細胞進行病原分離,經RT-PCR鑒定及測序分析。血液、體液、分泌物、糞便等宿主來源並包含病毒的物質稱病料,病毒分離時,傳代細胞系、原代細胞是常用的分離方法。
3. 高致病性禽流感診斷方法和程序是什麼
(1)流行病學
禽流感病毒的宿主廣泛,雞、火雞、鴨、鵝、鵪鶉和雉雞等家禽及野鳥、水禽、海鳥等均可感染。其中以雞和火雞感染禽流感病毒後的危害最為嚴重,而在鴨中分離到的病毒比其他禽類多。各種日齡的禽均可感染。
禽流感病毒主要通過與患禽(包括與患禽接觸的器具)的直接接觸和間接接觸傳染。此外,帶毒的飛鳥或水禽常常成為傳染源,引起家禽大批發病和死亡。
(2)臨床症狀
禽流感的潛伏期從幾小時到3天不等,潛伏期的長短依賴於感染病毒的毒力和劑量、感染途徑、被感染禽的種別和禽體的狀態。急性感染的禽流感無特定臨床症狀,在短時間內可見食慾廢絕,體溫驟升,呼吸道症狀,下痢,後期出現神經症狀。伴隨大量死亡。
(3)病理變化
禽流感的病理變化因感染毒株毒力的強弱、病程長短和禽種的不同而變化不一。主要表現為頭腫,肉髯、冠出血,小腿和趾部皮下出血,腺胃乳頭出血及輸卵管炎等。
(4)病原學診斷
病毒分離需由國家規定的實驗室完成。
(5)血清學診斷
目前用於禽流感檢測的方法有禽流感病毒分離技術、瓊脂擴散(AGP)試驗、血凝試驗、血凝抑制(HI)試驗、神經氨酸酶抑制(NI)試驗、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、病毒中和試驗(SN)、反轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)、免疫熒光技術(IF)及核酸探針技術。其中血凝試驗、血凝抑制試驗和瓊脂擴散試驗是OIE推薦使用的方法。
禽流感病毒血凝素分型抗原和標准分型血清均由中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所提供,按說明書操作。
4. 目前病毒分離培養的主要方法是哪一種
1.動物接種
這是最原始的病毒培養方法。常用的動物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接種的途徑有鼻內、皮下、皮內、腦內、腹腔內、靜脈等。根據病毒種類不同,選擇敏感動物及適宜接種部位。
2.雞胚接種雞胚對多種病毒敏感。根據病毒種類不同,可將標本接種於雞胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黃囊或絨毛尿囊膜上。
3.組織培養
將離體活組織塊或分散的活細胞加以培養,統稱為組織培養。組織培養法有三種基本類型:器官培養、移植培養和細胞培養。細胞培養最常用於培養病毒,根據細胞的來源,染色體特性及傳代次數又可分為下列類型:原代和次代細胞培養,二倍體細胞株和傳代細胞系。
5. 病毒毒株是怎麼分離的
病毒毒株分離就是用含病毒的標本材料接種到適合的細胞裡面。在這過程中要保證絕對的無菌環境操作,排除各種雜菌和其它微生物的污染。所以,一個有資質的、絕對干凈,無污染的實驗室和保證安全潔凈的標准操作是整個流程的關鍵點。
成功分離出新型冠狀病毒毒株的浙江省疾控中心微生物檢驗所所長張嚴峻:我們從病人痰液標本裡面給它(新型冠狀病毒毒株)處理了以後,接種到相應的細胞里,(讓)這個病毒在細胞里能夠生長。到了1月24日,我們對培養物進行鑒定,病毒已經在細胞里增殖,說明這個病毒培養分離已經成功了。
不是隨便一個實驗室都具有分離培養新型冠狀病毒的資質,要有這個資質,至少要有生物安全三級實驗室,而且實驗室人員資質、工作流程、污染物的處理都要通過嚴格的審核,同時對於每一種高致病性病毒分離培養活動,都要專門向國家衛生健康委員會提出申請,經過審核後才能開展特定的分離和培養活動。
(5)病毒分離程序是什麼擴展閱讀:
分離病毒毒株的意義
這能知道病毒是通過什麼樣的途徑侵入到人體當中怎樣的細胞器官里去的、在人體裡面是怎麼樣繁殖的、哪些部位會產生一些毒粒、這些毒粒怎樣作用於人類讓人類生病、最後這個病毒怎樣排出來再去感染人。通俗說可以知道它是誰、它到底要到哪裡去、去的哪個地方它到底要做哪些事情、做完壞事情之後它又怎樣逃出來到另外一個地方去干同樣的壞事,整個過程都可以給它弄清楚。
了解了整個過程之後,醫葯專家就可以針對性地去研究相應的葯物和疫苗,對病毒的預防、治療有著重大意義。
6. 簡述雞新城疫病毒的分離鑒定步驟。
(1)病料的採集和處理可採集病雞呼吸道分泌物、脾臟、血液、腦組織,按1:5的比例假入滅菌的生理鹽水或緩沖液,用研磨器將組織研碎製成20%的懸液,反復凍融2-3次,5000r/min離心20分鍾,取上清,用滅菌濾器過濾除菌或加抗生素殺滅病料中雜菌。
(2)分離培養將處理好的病料經尿囊腔接種9-11日齡無母源抗體的雞胚,37℃孵育,每天照蛋2次,棄除24小時內死亡胚,收集24-96小時死亡胚,96小時內未死亡胚取出。
(3)收集雞胚尿囊液採用血凝試驗檢查是否有血凝活性,對有血凝活性分離物應用標準的抗新城疫病毒,採用血凝抑制血清學試驗對病毒進行鑒定。
確定為新城疫病毒後對病毒的致病性做進一步鑒定--致病性試驗。
7. 怎麼樣把病毒從受感染文件中分離出來
分離要看你採用的是那種感染技術是添加新節還是採用插縫,如果是前者相對簡單,後者就有點麻煩,具體自己網路下,幾句是很難說清楚的
8. 動物病毒如何分離
細胞破碎,離心,病毒都在上清里。
9. 電腦里的病毒程序是什麼
一種惡意計算機代碼,可以破壞系統程序,佔用空間,盜取賬號密碼。嚴重可以導致網路、系統癱瘓。 詳見計算機病毒
去除方法
使用安 巴爾的摩分類法是基於病毒mRNA的合成方式
全的殺毒軟體清除。
病毒名
由以下6欄位組成的:主行為類型.子行為類型.宿主文件類型.主名稱.版本信息.主名稱變種號#附屬名稱.附屬名稱變種號.病毒長度。其中欄位之間使用「.」分隔,#號以後屬於內部信息,為推舉結構。
主行為類型與病毒子行為類型
病毒可能包含多個主行為類型,這種情況可以通過每種主行為類型的危害級別確定危害級別最高的作為病毒的主行為類型。同樣的,病毒也可能包含多個子行為類型,這種情況可以通過每種主行為類型的危害級別確定危害級別最高的作為病毒的子行為類型。其中危害級別是指對病毒所在計算機的危害。 病毒主行為類型有是否顯示的屬性,用於生成病毒名時隱藏主行為名稱。它與病毒子行為類型存在對應關系,見下表: 主行為類型 子行為類型 Backdoor 危害級別:1 說明: 中文名稱—「後門」, 是指在用戶不知道也不允許的情況下,在被感染的系統上以隱蔽的方式運行可以對被感染的系統進行遠程式控制制,而且用戶無法通過正常的方法禁止其運行。「後門」其實是木馬的一種特例,它們之間的區別在於「後門」可以對被感染的系統進行遠程式控制制(如:文件管理、進程式控制制等)。 Worm 危害級別:2 說明: 中文名稱—「蠕蟲」,是指利用系統的漏洞、外發郵件、共享目錄、可傳輸文件的軟體(如:MSN、OICQ、IRC等)、可移動存儲介質(如:U盤、軟盤),這些方式傳播自己的病毒。這種類型的病毒其子型行為類型用於表示病毒所使用的傳播方式。 Mail 危害級別:1 說明:通過郵件傳播 IM 危害級別:2 說明:通過某個不明確的載體或多個明確的載體傳播自己 MSN 危害級別:3 說明:通過MSN傳播 QQ 危害級別:4 說明:通過OICQ傳播 ICQ 危害級別:5 說明:通過ICQ傳播 P2P 危害級別:6 說明:通過P2P軟體傳播 IRC 危害級別:7 說明:通過ICR傳播 說明:不依賴其他軟體進行傳播的傳播方式,如:利用系統漏洞、共享目錄、可移動存儲介質。 Trojan 危害級別:3 說明: 中文名稱—「木馬」,是指在用戶不知道也不允許的情況下,在被感染的系統上以隱蔽的方式運行,而且用戶無法通過正常的方法禁止其運行。這種病毒通常都有利益目的,它的利益目的也就是這種病毒的子行為。 Spy 危害級別:1 說明:竊取用戶信息(如:文件等) PSW 危害級別:2 說明:具有竊取密碼的行為 DL 危害級別:3 說明:下載病毒並運行 一、判定條款: 沒有可調出的任何界面,邏輯功能為:從某網站上下載文件載入或運行. 二、邏輯條件引發的事件: 事件1、.不能正常下載或下載的文件不能判定為病毒。 操作準則:該文件不能符合正常軟體功能組件標識條款的,確定為:Trojan.DL 事件2.下載的文件是病毒 操作準則: 下載的文件是病毒,確定為: Trojan.DL IMMSG 危害級別:4 說明:通過某個不明確的載體或多個明確的載體傳播即時消息(這一行為與蠕蟲的傳播行為不同,蠕蟲是傳播病毒自己,木馬僅僅是傳播消息) MSNMSG 危害級別:5 說明:通過MSN傳播即時消息 QQMSG 危害級別:6 說明:通過OICQ傳播即時消息 ICQMSG 危害級別:7 說明:通過ICQ傳播即時消息 UCMSG 危害級別:8 說明:通過UC傳播即時消息 Proxy 危害級別:9 說明:將被感染的計算機作為代理伺服器 Clicker 危害級別:10 說明:點擊指定的網頁 判定條款: 沒有可調出的任何界面,邏輯功能為:點擊某網頁。 操作準則: 該文件不符合正常軟體功能組件標識條款的,確定為:Trojan.Clicker。 (該文件符合正常軟體功能組件標識條款,就參考流氓軟體判定規則進行流氓軟體判定) Dialer 危害級別:12 說明:通過撥號來騙取Money的程序 說明:無法描述其利益目的但又符合木馬病毒的基本特徵,則不用具體的子行為進行描述 AOL 按照原來病毒名命名保留。 Notifier 按照原來病毒名命名保留。 Virus 危害級別:4 說明:中文名稱—「感染型病毒」,是指將病毒代碼附加到被感染的宿主文件(如:PE文件、DOS下的COM文件、VBS文件、具有可運行宏的文件)中,使病毒代碼在被感染宿主文件運行時取得運行權的病毒。 Harm 危害級別:5 說明:中文名稱—「破壞性程序」,是指那些不會傳播也不感染,運行後直接破壞本地計算機(如:格式化硬碟、大量刪除文件等)導致本地計算機無法正常使用的程序。 Dropper 危害級別:6 說明:中文名稱—「釋放病毒的程序」,是指不屬於正常的安裝或自解壓程序,並且運行後釋放病毒並將它們運行。 一.Dropper判定條款: 沒有可調出的任何界面,邏輯功能為:自釋放文件載入或運行。 二.邏輯條件引發的事件: 事件1:.釋放的文件不是病毒。 操作準則: 釋放的文件和釋放者本身沒邏輯關系並該文件不符合正常軟體功能組件標識條款的,確定為:Droper 事件2:釋放的文件是病毒。 操作準則: 釋放的文件是病毒,確定該文件為:Droper Hack 危害級別:無 說明:中文名稱—「黑客工具」,是指可以在本地計算機通過網路攻擊其他計算機的工具。 Exploit 說明:漏洞探測攻擊工具 DDoser 說明:拒絕服務攻擊工具 Flooder 說明:洪水攻擊工具 說明:不能明確攻擊方式並與黑客相關的軟體,則不用具體的子行為進行描述 Spam 說明:垃圾郵件。 Nuker Sniffer Spoofer Anti 說明:免殺的黑客工具 Binder 危害級別:無 說明:捆綁病毒的工具 正常軟體功能組件標識條款:被檢查的文件體內有以下信息能標識出該文件是正常軟體的功能組件:文件版本信息,軟體信息(注冊表鍵值、安裝目錄)等。 Autorun 危害級別:9 說明:用U盤傳播的系統文件(被利用) 這樣的病毒殺毒軟體查不出來 宿主文件 宿主文件是指病毒所使用的文件類型,有是否顯示的屬性。目前的宿主文件有以下幾種。 JS 說明:JavaScript腳本文件 VBS 說明:VBScript腳本文件 HTML 說明:HTML文件 Java 說明:Java的Class文件 COM 說明:Dos下的Com文件 EXE 說明:Dos下的Exe文件 Boot 說明:硬碟或軟盤引導區 Word 說明:MS公司的Word文件 Excel 說明:MS公司的Excel文件 PE 說明:PE文件 WinREG 說明:注冊表文件 Ruby 說明:一種腳本 Python 說明:一種腳本 BAT 說明:BAT腳本文件 IRC 說明:IRC腳本
主名稱
病毒的主名稱是由分析員根據病毒體的特徵字元串、特定行為或者所使用的編譯平台來定的,如果無法確定則可以用字元串」Agent」來代替主名稱,小於10k大小的文件可以命名為「Samll」。
版本信息
版本信息只允許為數字,對於版本信息不明確的不加版本信息。
主名稱變種號
如果病毒的主行為類型、行為類型、宿主文件類型、主名稱均相同,則認為是同一家族的病毒,這時需要變種號來區分不同的病毒記錄。如果一位版本號不夠用則最多可以擴展3位,並且都均為小寫字母a—z,如:aa、ab、aaa、aab以此類推。由系統自動計算,不需要人工輸入或選擇。
附屬名稱
病毒所使用的有輔助功能的可運行的文件,通常也作為病毒添加到病毒庫中,這種類型的病毒記錄需要附屬名稱來與病毒主體的病毒記錄進行區分。附屬名稱目前有以下幾種: Client 說明:後門程序的控制端 KEY_HOOK 說明:用於掛接鍵盤的模塊 API_HOOK 說明:用於掛接API的模塊 Install 說明:用於安裝病毒的模塊 Dll 說明:文件為動態庫,並且包含多種功能 (空) 說明:沒有附屬名稱,這條記錄是病毒主體記錄
附屬名稱變種號
如果病毒的主行為類型、行為類型、宿主文件類型、主名稱、主名稱變種號、附屬名稱均相同,則認為是同一家族的病毒,這時需要變種號來區分不同的病毒記錄。變種號為不寫字母a—z,如果一位版本號不夠用則最多可以擴展3位,如:aa、ab、aaa、aab以此類推。由系統自動計算,不需要人工輸入或選擇。
病毒長度
病毒長度欄位只用於主行為類型為感染型(Virus)的病毒,欄位的值為數字。欄位值為0,表示病毒長度可變。
10. 實驗室是如何分離生物病毒的
我覺得這個裡面的東西咱們根本就不太懂,實驗室它就是有它單獨的方法來分離那些生物病毒,那個是需要技術方面的問題,並不是一般的人就可以懂得的問題。