❶ 實驗數據記錄的要求
記的是原始數據,實驗測得是多少就多少,如實記錄,還有就是有效數字的取捨,及註明數據的單位,一般把要測的數據列一個表格將相應的數據填上去就可以了!
❷ 如何更好地記錄實驗數據
如何科學有效地記錄實驗數據
在實驗學科中,數據起著至關重要的作用,獲得科學有效的數據是每個實驗者所應具有的素質。在我們實驗室近十年工作經驗的基礎上,結合其他實驗室的經驗,主要對旋光、核磁及對映體過量(ee值)等數據測定中應注意的事項加以列舉。原則是:盡量第一時間收集齊必要數據,否則以後補充數據會花費許多不必要的時間和精力,如果是已知物要和文獻數據加以對照。對未知化合物應該收集核磁共振氫譜和碳譜、高分辨質譜或者元素分析、熔點(如果是固體)、旋光(如果是手性化合物)和紅外光譜等;對已知化合物應該收集核磁共振氫譜、熔點(如果是固體)和旋光(如果是手性化合物)等。在測試結束後,應及時、准確地將數據記錄在實驗記錄本上(不要先抄寫在一張小紙條上,然後再抄到實驗記錄本上,步驟越多,出錯的可能性越大),以備查閱、撰寫論文和在以後的研究工作中作為參考。
第一部分:測定旋光注意事項
1. 得到產品後,要盡快測定其旋光(這里的旋光為比旋光度),不宜長時間放置後再測定。因為長時間放置可能會導致產品變質,再次測量時瓶子的質量也可能因為天平沒有校正而發生變化,從而導致旋光值不準確。
2. 測定旋光前,如果是已知物要查明文獻中報道的旋光值,最好多查幾篇文獻,因為許多文獻的數值不一致,盡量選擇權威論文的數據,包括濃度、溫度、溶劑及旋光值。測定產品的旋光時,可以與文獻值比較,做到心中有數。
3. 待測的產品在測量前一定要抽干,以保證稱量質量的准確。
4. 配製待測產品溶液所用的溶劑最好用新開封的。因為已開封的溶劑在使用時可能被污染,會有雜質,造成測定數據不準確。
5. 配製的待測產品溶液的濃度要適中,不宜太高,也不宜太低,一般濃度為0.2-1.0(10
mg/mL-100
mg/mL)左右為好。
6. 配製的待測溶液時,產品在其中要全部溶解。若溶解後為渾濁液,應考慮使用溶解度更好的溶劑;若溶解後有小顆粒,證明產品中有雜質,必須先將產品進行處理,除去不溶性的雜質,再進行測定。
7. 測定旋光前最好用一個已知旋光值的物質作為標准,對所用旋光儀進行校準,以保證旋光儀測量數據的准確。
8. 開啟旋光儀後需等一段時間再進行測量。因為旋光儀所用鈉光燈的正常起輝時間至少20
分鍾,之後發光才能穩定,這時測定才會比較准確。
9. 測定管光面兩端的玻璃,在測量時不要用手觸摸,以免玻璃被污染,影響光路,使測量不準確。如果不幹凈,用軟布或專門的擦拭紙擦凈,不要使用普通的紙,以免損傷玻璃面,影響光路。
10. 將裝有待測溶液的測定管放入樣品室之前,一定要確保光路中沒有氣泡,否則會對樣品的旋光值有較大的影響。
11. 測定時應盡量固定測定管放置的位置和方向,做好標記,以減少測定管及蓋玻片應力的誤差,使測量數據更准確。
12. 測定旋光時一定要及時記錄測定時的溫度。因為溫度對物質的旋光有一定影響,不同的溫度下測定的旋光值可能有所差別。
13. 測定旋光時一定要及時記錄所用的溶劑。因為在不同溶劑中,由於締合、溶劑化和解離等情況的不同,會使比旋度產生變化,甚至改變旋光方向。具有1,3-丙二醇結構的氯黴素Chloramphenical,只有(1R,2R)-(-)-異構體才顯示抗菌活性,其在無水乙醇中呈右旋性,比旋光度+18.5~+21.5,而在乙酸乙酯中呈左旋性,比旋光度為-25.5。
14. 測定結束後,將測定管洗凈晾乾放回原處。數據要立即寫在記錄本上,最好將文獻中的旋光數據也寫在記錄本上,與所得數據加以對照。
第二部分:核磁測試注意事項
1. 得到產品後,核磁共振要立即測,不宜長時間放置後再去測,因為長時間放置可能導致產品變質。其中一種極端情況是:長時間放置後產物會發生異構化,如反式異構體變為順式異構體,或者發生重排反應等,從而導致測定的核磁共振數據不準確。
2. 實驗室測試所用核磁管一般內徑為5
mm,(微量樣品用3 mm的樣品管)氘代試劑溶解後的樣品體積在核磁管中高度約3.5 cm,體積約0.5
mL,溶劑量太少會影響勻場,溶劑量過多則造成浪費。
3. 氫譜測試所需樣品量較少,約3-7 mg,碳譜測試所需樣品量較多,一般需要多於20
mg,測試氫譜時濃度太低則噪音較大、基線不平;濃度太高則譜峰裂分不好,請適當掌握;測試13C時濃度高可縮短測試時間,噪音小,基線平直,譜圖漂亮。若1H、13C譜同時做,要保證管裝樣品量大於20
mg。
4. 為保證譜圖質量,核磁管必須清洗干凈,樣品的純度越高越好,其中殘余溶劑必須除凈,否則嚴重影響譜圖的解析。樣品在氘代試劑中溶解度要好(送樣人要提前選好合適溶劑),溶解後溶液均勻透明,若有固體微粒必須首先過濾,否則儀器不能測試,並且樣品中不得含順磁性物質。
5. 核磁管要及時清洗,先加入對樣品溶解性最好的溶劑沖洗,一般使用丙酮,清洗2-3次後,使用核磁管刷(末端綁上棉花)清洗,再用丙酮清洗干凈。核磁管在乾燥箱中最好不要平放,一定要多支捆綁在一起立著放,這樣能保證核磁管在高溫下不變形。
6. 有些樣品在常溫下兩個構象異構體轉化的能壘較高,不能迅速達到平衡,這時核磁共振譜圖上會出現一些寬峰,甚至消失或不出現。這時如果把做核磁共振的溫度提高,兩種構象異構體異構體能迅速達到平衡(具體的例子,可參考:J.
Org. Chem. 2005, 70, 1679),這樣就能得到正常的核磁共振譜圖。
第三部分:對映體過量(ee值)測試注意事項
高效液相色譜測對映體過量(ee值)時,需要的樣品量不多,但是需要消旋的樣品作為對照,否則無法區分雜質與樣品的峰值(尤其是ee值高時)。同時也要注意以下幾個方面:
1. 需要的樣品量在色譜圖上濃度在80-200
mAU之間為好,太少噪音峰容易造成干擾,太多可能會在柱上殘留,信號峰強度最好不要超過500 mAU,
以防堵塞色譜柱。測試前可以在硅膠板上用毛細管點樣用紫外燈顯色後根據經驗觀察濃度是否合適。
2. 樣品純度要高,否則雜質可能會與目標峰完全重合或是部分重合,從而造成測定數據不準確,不能得到漂亮的色譜圖;另外,若是樣品中含有較多的雜質,特別是粉末狀雜質,則會堵塞手性柱。因此,在配製樣品時,應使樣品完全溶解,或使用過濾器過濾得到澄清溶液。
3. 配置前樣品中的殘余溶劑要除凈,防止因溶劑峰過高而不能得到漂亮的色譜圖。溶解樣品的溶劑最好選擇和流動相相同的溶劑,或者是流動相中的溶解性較好的那種溶劑。
4. 配置樣品時,要將樣品完全溶解後,取一到兩滴轉移到專用的液相測量瓶中,再加入溶劑稀釋到合適的濃度。對固體樣品,一定要將樣品完全溶解後配製,因為在固體樣品中,各部分ee值可能不同(如外消旋化合物,一部分可能為100%
ee,另外一部分可能為0%
ee),這樣可能造成數據重復性很差。所以對於固體樣品,一定要將樣品全部溶解後取適量於樣品瓶中,再稀釋到需要濃度。
5. 樣品一般需要現場配製,長時間放置後容易變質。
6. 使用手性柱測定HPLC數據時,要注意柱壓不要超過50
bar。如使用異丙醇/正己烷作為流動相時,溶劑體積比為90/10時,流速一般不超過1.0 mL/min, 為80/20時,流速一般不超過0.8 mL/min,
選擇更大極性的流動性時,流速相應也要降低,以使柱壓不超過50
bar.
7. 測定樣品時,要注意流動相的體積變化,當少於總體積的20%時,應及時添加流動相,以防止體系中進入氣體。
8. 測定後的數據要及時記錄在實驗記錄本和專用的HPLC數據記錄本上。
以上為根據經驗所總結的測定旋光、核磁和ee值中所需要注意的事項,要獲得科學的實驗數據請參照上述經驗進行操作。原則是:盡量第一時間收集齊所有的必要數據。對未知化合物應該收集核磁共振氫和碳譜、高分辨質譜或者元素分析、熔點(如果有)、旋光(如果有)和紅外光譜等;對已知化合物應該收集核磁共振氫和碳譜、熔點和旋光(如果有)等。若有不足或不當之處,請指正。
❸ 臨床試驗中的各種實驗室數據應如何記錄
臨床試驗中各種實驗室數據均應記錄或將原始報告復印件粘貼在病例報告表上,在正常范圍內的數據也應具體記錄。對顯著偏離或在臨床可接受范圍以外的數據須加以核實。檢測項目必須註明所採用的計量單位。
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