A. ELISA實驗數據處理方法是怎樣的
ELISA試劑盒在國內有許多種叫法:例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA?Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等?ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由於其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。本章交流分享:ELISA實驗數據處理方法是怎樣的?想要了解的同學歡迎來電咨詢。
1、擬和曲線:
輸入行: 濃度值, 如0 10 50 100
輸入第二行:該濃度下的調整後的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數據,用插入里的圖表按鈕,進入圖表向導,在「標准類型」中選擇「xy散點圖」;在「子圖表類型」中選擇「折線散點圖」,按「下一步」;選擇「系列產生在行」,按「下一步」;數據標志,可以填寫:如數據y軸,OD值;數據x軸,濃度;按下一步,點擊完成。可得曲線圖。
單擊曲線,按右鍵,選擇「添加趨勢線」,在類型中,選擇多項式;在選項中,選擇顯示公式,選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說的方法:雙擊圖表,把它輸入到圖表的數據中,就可以擬和曲線。
2、計算濃度:
次實驗:
標准曲線為:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例,已知OD值,計算濃度。
由於y = -4E-05x2 + 0.026x,所以可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0
a=4E-05;b=-0.026;
x=(-b-(b*b-4ay)(平方根))/(2*a)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004)
通用公式為:
x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)
應用excel的公式拷貝功能,計算所有濃度